干酪乳杆菌在老白干香型白酒中的应用

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论文以衡水老白干中温大曲中分离筛选出的干酪乳杆菌(Lactobacillus, casei)HJB-006为研究对象。对菌体培养条件进行优化,并在优化条件下进行三级扩大培养,应用于老白干大型酿造生产中,以提高基酒质量;对菌体产酸条件进行优化,对双水相体系分离提取发酵液中的乳酸进行研究。通过单因素和正交试验,对菌体生长培养基和培养条件进行优化,确定了培养基成分为:大豆蛋白胨10 g/L,蔗糖28g/L, Fe2+浓度2.3×10-4mol/L, Mn2+;浓度3.0×10-3mol/L, Mg2+浓度为3× 10-4 mol/L,柠檬酸三铵4 g/L,乙酸钠6 g/L,培养基初始pH值为7;最佳培养条件为:装液量65mL/100mL、培养时间72h、接种量1%、培养温度36℃,在此培养基和培养条件下,菌体OD600吸光值为0.82,较优化前提高64.66.%。菌体扩大培养后,应用于冬季低温条件下酒醅的发酵生产中,可明显增加基酒中的乳酸乙酯含量。当接种到酒醅中的菌体浓度为4.0×106cfu/g时,蒸馏出的基酒中乳酸乙酯含量达332.58 mg/100mL,较未接种乳杆菌的空白组提高350.35%,而且其他成分含量基本不变,此基酒可作为高酯调味酒;通过撩酒员品评分析,当接种量为3.5× 106cfu/g时,基酒口感最佳,其中乳酸乙酯含量为181.32 mg/100mL,较未添加时提高145.56%,乙酸乙酯含量100.77 mg/100mL,此时,乳酸乙酯与乙酸乙酯之比为1.8,符合老白干香型白酒中乳酸乙酯:乙酸乙酯≥0.8的要求。通过单因素和正交实验,确定了菌体最佳发酵产酸培养基及培养条件。建立了PEG/DEX双水相体系,用以分离提取乳酸。通过双水相体系的选择与参数优化,使得乳酸富集于上相,而杂蛋白、碎菌体等进入下相,达到乳酸分离的目的,乳酸萃取率达到96.97%。
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