玉米核糖体失活蛋白基因的克隆及序列分析

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本文提取玉米RNA,并反转录成cDNA.以此为模板,合成特异性引物,应用多聚酶链式反应(PCR)技术扩增出目的片段.对PCR片段直接进行序列分析,测定并克隆了玉米的核糖体失活蛋白(RIP)基因.序列分析表明,已测定的玉米RIP基因序列长为98 3bp,其中编码区长828bp,共编码有275个氨基酸和一个终止密码子,GC含量为58.3%.与发表的序列相比较,其核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分别为98.4%和97.4%.推导的玉米RIP氨基酸一级结构分为:(1)前导肽,16个氨基酸;(2)α肽链,144个氨基酸;(3)连接肽17个氨基酸;(4)β肽链,71个氨基酸;(5)C端肽段,27个氨基酸.将玉米RIP基因以正确方式连接到植物表达载体pBI121上,用于转基因植物.
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