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全球水产甲壳类养殖,正面临生态环境恶化和多种暴发性疾病侵袭的双重危害,故损失巨大。目前,环境因子作为引起虾病暴发的三大因素之一,开始受到较广泛的关注,研究养殖生态环境与虾类自身免疫抗病能力的关系,已成为虾类病害防治领域的重要课题之一。而氨态氮和亚硝态氮则是养殖环境中最主要的外来和自身污染物。本文从血细胞计数、血细胞超微结构、4种免疫相关酶类及可溶性蛋白等方面系统地研究了氨态氮和亚硝态氮对罗氏沼虾免疫能力的影响。本研究以罗氏沼虾Mocrobrachium rosenbergii为材料,试图在探讨环境因子与该虾免疫参数关系的基础上,建立自然种群的免疫数据库,并为虾类免疫抗病研究提供相应的理论依据。 研究结果表明,0.1mg/L氨态氮和0.1mg/L亚硝态氮对罗氏沼虾免疫抗病能力产生以下显著影响: 1.在氨态氮和亚硝态氮的作用条件下,罗氏沼虾总血细胞计数均有减少,且亚硝态氮的短期作用大于氨态氮;透射电镜观察的结果表明,在氨态氮和亚硝态氮作用前后,罗氏沼虾血细胞超微结构发生改变,透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞三种血细胞粗面内质网、核糖体和线粒体数量减少,其中,以氨态氮作用引起血细胞超微结构变化幅度较大。 2.在氨态氮和亚硝态氮作用条件下,罗氏沼虾血清、肝胰腺和肌肉中的酚氧化酶、超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶及酸性磷酸酶活性变化不同,经1d、4d、7d及10d处理后,血清和肌肉酚氧化酶活力均有所降低,但变化过程不同,而肝胰腺酚氧化酶活力则略有增高;各组织中的超氧化物歧化酶活力基本变化过程为,先增高,后降低;各组织的两种磷酸酶活力则有不同程度的增高。 3.在氨态氮和亚硝态氮作用条件下,罗氏沼虾血清、肝胰腺和肌肉可溶性蛋白含量均降低。经SDS-PAGE分析,各组织的蛋白谱带有不同程度的改变,表明氨态氮和亚硝态氮严重干扰了机体内蛋白质的生物合成。总括上述,0.1mg/L的氨态氮和亚硝态氮对罗氏沼虾的免疫抗病能力具有显著的影响,且亚硝态氮的作用较明显。总血细胞计数、血细胞超微结构、可溶性蛋白浓度及酚氧化酶与超氧化物歧化酶活性等可作为判断虾类免疫抗病能力的指标,而两种磷酸酶活性则仅作辅助参数。