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食源性致病菌的污染是食品安全的主要威胁之一,每年有数百万人深受其害。为控制食源性致病菌的污染,建立新型的检测方法,实现对食源性致病菌的超灵敏、快速检测非常重要。本研究选取肠炎沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7两种感染性强、危害性大的食源性致病菌作为检测对象,分别构建了两种简单高效的免疫层析快速检测方法,主要研究结果如下:1、基于表面正电富氮碳纳米材料的免标记免疫层析快速检测方法的构建及性能鉴定:本试验引入“纳米材料-细菌-抗体”的新型夹心结构,选取表面正电富氮碳纳米材料(p NC)作为一种细菌吸附探针,构建了一种免标记免疫层析方法用于对肠炎沙门氏菌的快速检测。与传统标记探针相比,通过煅烧和表面刻蚀两步法合成的p NC可以用作吸附剂捕获细菌并产生信号,既克服了传统标记探针制备复杂、稳定性低等缺点;又大大降低了制作成本。通过对探针浓度、孵育时间等条件的优化,该新型免疫层析试纸条可以实现对肠炎沙门氏菌的超灵敏检测,检测灵敏度为102 cfu m L-1,且该免疫层析试纸条与其他几种常见的食源性致病菌不存在交叉反应,检测特异性强。此外,在对多种食品样品(饮用水、卷心菜、西瓜汁和紫甘蓝)中肠炎沙门氏菌污染的检测过程中,这种新型免疫层析试纸条呈现出良好的检测性能,检测线可达到102 cfu m L-1、103 cfu m L-1、103 cfu m L-1和103 cfu m L-1。因此,这种新型免标记免疫层析试纸条在食源性致病菌的检测领域具有良好的实际应用潜力。2、基于功能化普鲁士蓝纳米材料的免标记免疫层析快速检测方法的构建及性能鉴定:本试验设计了一种新型功能化普鲁士蓝(man-PB)纳米材料作为免标记探针,应用于大肠杆菌O157:H7的快速检测。与传统检测探针相比,无需复杂的抗体标记过程,这种新型探针可以通过特殊的亲和力与大肠杆菌的鞭毛蛋白特定位点结合。此外,良好的酶促活性为该免疫层析试纸条提供了多重信号输出方式,克服了传统方法中单一信号输出方式的限制。通过对探针浓度、孵育时间等条件的优化,该新型免疫层析试纸条可以实现对大肠杆菌O157:H7的超灵敏检测,检测灵敏度达102 cfu m L-1,并可提供多重信号输出方式用于对目标致病菌的定量检测。该免疫层析试纸条与其他几种常见的食源性致病菌没有交叉反应,特异性强。此外,在多种食品样品(饮用水、牛奶、西瓜汁和紫甘蓝)的肠炎沙门氏菌污染的检测中,这种新型免疫层析试纸条呈现出良好的检测性能,检测线可达到102 cfu m L-1、102 cfu m L-1、103 cfu m L-1和103 cfu m L-1。因此,这种新型免标记免疫层析试纸条在食源性致病菌的检测领域具有良好的实际应用潜力。