结直肠炎相关结直肠肿瘤模型的建立与机制初步探讨

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目的:探讨AOM/DSS致结直肠炎相关结直肠肿瘤模型的构建,及其在此炎症肿瘤模型中TLR4及相关炎症因子表达情况的相关机制研究。方法:本研究拟联合运用致癌剂—AOM使DNA甲基化致突变和致炎剂—DSS诱导肠粘膜的反复损伤和修复促进肠上皮的增殖和异常转换模拟人类慢性炎症的促癌作用。建模首日给予AOM (10mg/kg)腹腔注射1次,改变DSS给予的浓度和时间,建立不同炎症反应的动物模型,即3% DSS 7天模型组(40只)、3% DSS 5天模型组(40只)、2.5% DSS 7天模型组(40只)、2.5% DSS 5天模型组(30只)及正常对照组(10只)。通过肠组织HE染色确定肿瘤分级及组织炎症反应程度;免疫组织化学检测TLR4在各组模型中的表达情况;PCR检测其相关炎症因子的表达情况。结果:1.3% DSS 5天模型组均达到腺瘤Ⅲ级,成瘤数目(5.25±1.39)个,组织炎症评分(7.50±2.78)分;2.5% DSS 7天模型组肿瘤均达到腺瘤Ⅱ级,成瘤数目(1.67±1.03)个,组织炎症评分(4.67±1.03)分;2.5% DSS 5天模型组小鼠均达到腺瘤Ⅱ级,成瘤数目(1.75±1.39)个,组织炎症评分(2.50±0.90)分。3% DSS 5天模型组比其余两组模型组肿瘤级别和成瘤数目高(P<0.05),且组织炎症反应较重(P<0.05),3组模型组体重变化及存活率之间没有显著差别(P>0.05)。此外3% DSS 7天模型组小鼠死亡率100%。 2.3% DSS 5天模型组肿瘤组织中TLR4免疫组化表达评分(6.75±1.39)分,2.5% DSS 7天模型组(5.00±1.07)分及2.5%DSS 5天模型组(4.75±1.04)分,且3% DSS 5天模型组肿瘤组织中TLR4免疫组化表达评分明显高于2.5% DSS 7天模型组和2.5% DSS 5天模型组(P<0.05),2.5% DSS 7天模型组和2.5% DSS 5天模型组之间没有差别(P>0.05)。3.3% DSS 5天模型组肿瘤组织炎症因子IL-6, TNF-a, COX-2 mRNA表达水平比2.5% DSS 7天模型组和2.5% DSS 5天模型组高,而2.5% DSS 7天模型组和2.5% DSS 5天模型组中表达水平差异不明显,但均较对照组高。结论:3% DSS 5天模型组为较为理想的动物模型;慢性炎症促进炎症相关结直肠肿瘤的发生;这可能与TLR4蛋白的过表达及其相关炎症因子的表达有关。
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