产抑制革兰氏阴性菌细菌素菌株的筛选鉴定及植物乳杆菌素LPC818的纯化

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植物乳杆菌产生的细菌素不仅种类多,其菌株可产生良好的保健功效,因此成为研究的热点之一。为获得产细菌素的优良菌株,本文从多种植物源材料中筛选出4株产细菌素的菌株,并对各菌株进行了分类鉴定。在此基础之上,对植物乳杆菌LPC818产生的具广谱抑菌作用的细菌素plantaricin LPC818,进行了较为深入的研究。具体研究结果如下:1.从多种植物源材料中筛选到4株产细菌素菌株,经生理生化特性和16SrRNA基因序列的同源性分析鉴定,其中3株菌为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum),1株为亚利桑纳乳杆菌(Lactobacillus arizonensis);2. plantaricin LPC818对酸有一定的依赖性,在pH3~5.5时,具有抑菌活性;plantaricin LPC818的热稳定性较好,经100℃处理30min抑菌活力仍保持在80%以上;plantaricin LPC818对蛋白酶E、蛋白酶K和脂肪酶敏感,对糜蛋白酶和木瓜蛋白酶部分敏感,表明plantaricin LPC818为脂蛋白类物质;3. plantaricin LPC818的抑菌谱较广,对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有较强的抑菌作用。以鸡白痢沙门氏菌为指示菌,确定了plantaricin LPC818的作用方式为杀菌;4.经60%饱和度的硫酸铵沉淀、Sephadex G-25凝胶层析和反向HPLC三步纯化,plantaricin LPC818的纯化倍数为7.87,得率为0.8%;通过蛋白质电泳及ESI-MS跟踪检测,推断出plantaricin LPC818的分子量为745.10Da。
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