基于多壁碳纳米管和4-SPCE的福氏志贺氏菌酶免疫传感器的研制

来源 :浙江工商大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:renewmyself
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
志贺氏菌是引起人类传染性疾病的主要病原体之一,平均每年都有上百万人感染痢疾。由志贺氏菌感染而引发的痢疾每年造成100多万人死亡,其中大多数是发展中国家的儿童。因此,志贺氏菌的检测对全球性痢疾和死亡的威胁非常重要,也对公众健康非常重要。过去几十年里,基于抗原-抗体特异性反应的电化学免疫传感器直是研究热点,广泛应用于食品分析、临床诊断、环境监测等研究领域。新型纳米材料和纳米技术的迅速发展为电分析化学提供了更多新的机会,多壁碳纳米管具有生物电化学稳定性和明显促进生物分子的电子传递作用,能作为生物活性物质的固定基质和构建生物传感器,在生物传感器领域具有较大的应用前景。本论文主要围绕以下几个方面开展了一些研究工作:1福氏志贺氏菌抗原的制备与灭活本试验成功制备了福氏志贺氏菌抗原,平板计数得抗原浓度为1011cfu/mL,然后以0.4%(v/v)甲醛灭活12 h。抗原形态学与文献报道一致,具有良好的生物活性和特异性,为后续工作的顺利开展奠定了基础。2多壁碳纳米管修饰的4-SPCE直接检测过氧化氢的研究构建用于过氧化氢检测的多壁碳纳米管修饰四通道丝网印刷碳电极,循环伏安阳极最大电流法测试结果表明:多壁碳纳米管能提高电极的有效表面积和加速电子的传递,循环伏安阳极最大电流与过氧化氢的浓度变化成线性关系,灵敏度和线性相关系数分别为0.3192μA/(mmol/L)和0.9979;检测方法过程简单,结果令人满意,为后续免疫传感器的研究打下了很好的基础。3基于多壁碳纳米管/DMF复合物和4-SPCE的福氏志贺氏菌酶免疫传感器的研制利用戊二醛交联法将辣根过氧化物酶标记的福氏志贺氏菌抗体固定在多壁碳纳米管修饰的四通道丝网印刷碳电极表面,制备了可用于检测福氏志贺氏菌的酶免疫传感器。采用循环伏安法对不同修饰电极进行电化学表征。根据抗原-抗体特异性结合形成的免疫复合物使敏感膜有效扩散截面积减小的特性,采用循环伏安法检测样品中的福氏志贺氏菌。在优化的实验条件下,该酶免疫传感器对福氏志贺氏菌的检测范围为104~109cfu/mL,检出限为3.4×103cfu/mL(S/N=3)。该酶传感器还具有较好的选择性、重现性、稳定性和准确性4基于多壁碳纳米管/壳聚糖复合物和4-SPCE的福氏志贺氏菌酶免疫传感器的研制为研究快速检测福氏志贺氏菌的电化学免疫传感器,将羧基化多壁碳纳米管与壳聚糖制备成复合物,应用此复合物将辣根过氧化物酶标记的福氏志贺氏菌抗体一步直接固定在四通道丝网印刷碳电极表面,制成快速检测福氏志贺氏菌的酶免疫传感器。采用原子力显微镜表征不同修饰电极的表面形态,循环伏安法考察不同电极的电化学特性和监测酶促反应,利用免疫反应前后还原峰峰电流的减小来测定福氏志贺氏菌。在优化的测定条件下,免疫电极对福氏志贺氏菌的检测范围为104~109cfu/mL,检出限为2.3×104 cfu/mL(S/N=3)。而且该酶免疫传感器具有较好的特异性、重现性、稳定性和准确性,该方法还具有快速、简便、易于操作和价格低廉等优点,具有用十福氏志贺氏菌快速筛检的潜力。5基于多壁碳纳米管/海藻酸钠复合物和4-SPCE的福氏志贺氏菌酶免疫传感器的研制为快速检测福氏志贺氏菌,将辣根过氧化物酶标记的福氏志贺氏菌抗体吸附在多壁碳纳米管/海藻酸钠复合物修饰的四通道丝网印刷碳电极表面,制得快速检测福氏志贺氏菌的酶免疫传感器。采用原子力显微镜表征不同修饰电极的表面形态,循环伏安法考察不同电极的电化学特性,采用一步免疫法检测福氏志贺氏菌和循环伏安法监测酶促反应,根据免疫反应前后还原峰峰电流的降低值来检测样品中的福氏志贺氏菌。在优化的实验条件下,酶免疫传感器与福氏志贺氏菌浓度的对数在104~1010 cfu/mL范围内保持良好的线性关系,检出限为3.1×103 cfu/mL(S/N=3)。该酶免疫传感器具有较好的特异性、重现性、稳定性和准确性,可望初步用于福氏志贺氏菌的快速筛检。
其他文献
柴油机燃油的喷射与雾化过程对柴油机最终的燃烧品质有重要影响,而对柴油机喷油系统喷油规律的进一步优化能够更进一步的改善柴油机的燃烧状况。所以对喷油规律的测量方法的研
地鳖又名土元、土鳖,药用始见于《神农本草经》,在我国药用已有两干余年历史,祖国医学记载和丰富的临床实践均已证明其具有破血逐瘀、续筋接骨、消炎散结、舒经活血和疗伤止痛等
本课题系与澳大利亚昆士兰科技大学的合作项目内容,是在江苏省高校优势学科建设工程资助下开展的研究工作。   从过去的50年以来,由于心脏移植供体的短缺引起了人工心脏辅助
随着现代航空发动机和燃气轮机的发展,发动机的推重比和功率质量比是越来越高,从而导致对涡轮的负荷要求也越来越高,因此,对可以有效提高涡轮负荷的高负荷跨音速涡轮技术成为
随着我国工业化和城市化的加快建设,我国电力系统的发电量不断增大,但是随着用电量的增加和用电高峰的不可控性,电力系统短时间内电量负荷的波动幅度也在不断增加。抽水蓄能
为了寻找一种高效环保的鲜切西兰花保鲜方法,本文从保鲜剂、贮藏温度、包装材料三个方面对保鲜鲜切西兰花进行了研究。为研究乙醇处理对西兰花的影响,对贮藏期间西兰花幼嫩梗部
本文在阐述思想政治教育在青年大学生群体中落实“不忘初心,牢记使命”中的重要作用的同时结合自身的学习经验对具体的措施进行探究.
C_2H_4是一种植物激素,在果实蔬菜等园艺植物发育中慢慢积累,增加到一定浓度启动果蔬成熟。值得注意的是,一旦果蔬开始腐烂,内源乙烯就会迅速升高到饱和浓度,进而加速腐烂变质过程。在果蔬贮藏环境中,二氧化碳和乙烯同时存在还会导致果蔬代谢紊乱。这是因为乙烯改变了二氧化碳对果蔬的作用而引起果蔬采后代谢紊乱。乙烯的产生除了与果蔬自身的呼吸速率有关外,还与果蔬组织的完整程度及微生物繁殖所导致的腐败程度有重要
本文针对预防热氨制冷系统氨融霜过程液击诱发的系统爆炸事故频发的安全隐患所遇到的关键科学与技术瓶颈问题,研究构建了多相相变分层流动液击形成理论模型和相应的模拟方法,并通过数值模拟和实验研究揭示了热氨融霜过程中多相相变液击形成机理,明晰了影响液击的关键调控参数,提出了抑制液击冲击形成的关键技术和方法。基于回气总管液击冲击的安全评估,阐述了热氨制冷系统氨融霜过程液击诱发的系统爆炸事故频发的力学机理,研究
应用拮抗菌株进行果蔬采后病害的生物防治是一项很有潜力的新型保鲜技术。本研究旨在从灵武长枣果实上分离、筛选抑制果实采后病害的拮抗菌株,并对其进行鉴定,研究其生物学特