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近年来虽然云南省的山羊养殖业发展迅速,但多数养殖户仍然以较原始的养殖方式饲养山羊,对羊寄生虫危害与防控及其防治药物了解不够,即使是规模化养殖场对寄生虫病也不够重视,对羊寄生虫病流行病学调查等方面缺少深入的调查与研究。随着山羊饲养数量的不断增加,羊群寄生虫感染越来越重要。羊轻度感染寄生虫可引起消瘦、贫血、生长发育缓慢、饲料报酬降低,严重感染时可引起羊发病、甚至大批死亡,给养羊业造成巨大的经济损失。为此,本研究对云南省1 1个地州市的羊消化道寄生虫感染情况进行了调查与分析,对山羊球虫种类进行了鉴定,对羊2种重要的寄生虫种类进行分子鉴定,并在养殖场进行了驱虫药物评价试验,该研究结果为云南省山羊消化道寄生虫的防控提供了科学依据。一、山羊消化道寄生虫感染情况调查首先在玉溪市元江县11个乡镇采集了 339份羊粪便,用饱和盐水漂浮法与水洗沉淀法进行检查,结果显示所有羊场均感染寄生虫(100%,11/11),粪便样品中线虫卵检出率3.3%~83.3%,平均24.5%;球虫卵囊检出率26.7%~100%,平均69.0%;线虫与球虫混合感染率3.3%~56.7%,平均20.1%。随后,在云南省德宏州(陇川县)、临沧市(云县)、保山市(龙陵县)、昆明市(阿子营乡)、曲靖市(会泽县)、丽江市(永胜县)、西双版纳州(勐腊县)、红河州(泸西县)、大理州(鹤庆县)、昭通市(茂林乡)、昭通(盐津县)、11个地区共采集618份羊粪便,用饱和盐水漂浮法和水洗沉淀法检查,发现11个地区山羊均有寄生虫感染(100%,11/11);618份样品中均检出虫卵或卵囊,样品阳性率为100%,共检出莫尼茨绦虫(Moniezia spp.)、类圆线虫(Strongyloides spp.)、毛首线虫(Trichuris spp.)、毛圆科线虫(Trichostrongylidae spp.)和球虫(Eimeria spp.)等5种寄生虫,感染率分别为12.6%(78/618)、78.2%(483/618)、41.7%(258/618)、0.5%(3/618)和 98.5%(609/618),优势虫种为球虫和毛圆科线虫。从不同地区来看,球虫为11个地区的优势种,毛圆科线虫、类圆线虫为多个地区的优势种。11个地区中普遍存在多种寄生虫混合感染现象。共有502份样品存在2种及以上寄生虫的混合感染,总混合感染为81.23%,其中混合感染2、3、4种寄生虫的感染率分别为 35.9%(222/618)、43.7%(270/618)和 1.9%(12/618)。二、山羊球虫种类及其感染情况调查对昆明和大理等11个市或自治州山羊球虫种类进一步鉴定。首先,按常规方法分离粪便中的球虫卵囊,并放入2.5%重铬酸钾溶液中培养7 d,至卵囊孢子化;随后,根据卵囊形态结构鉴定球虫种类。结果显示,共发现艾丽艾美耳球虫(E.alijeri)、阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)、阿普艾美耳球虫(E.apsherenica)、山羊艾美耳球虫(E.caprina)、克氏艾美耳球虫(E.christenseni)、家山羊艾美耳球虫(E.hirci)和雅氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)等7种艾美耳球虫,其中阿氏艾美耳球虫感染率最高(83.0%,513/618),为优势种,其次为艾丽艾美耳球虫(70.9%,439/618);球虫多为混合感染,混合感染率达90.3%(558/618),最多有6种球虫同时感染一只羊。三、两种山羊寄生蠕虫的分子生物学鉴定对分离于山羊皱胃和小肠的线虫,首先进行形态学鉴定。然后,分别提取虫体的DNA,根据血矛线虫和仰口线虫的ITS基因序列设计一对种特异性引物,PCR扩增目的基因,将PCR扩增产物测序,对序列比较分析,构建进化树。结果显示,云南地区山羊感染的血矛线虫为捻转血矛线虫,仰口线虫为羊仰口线虫;进化分析表明捻转血矛线虫、羊仰口线虫无地域特异性,同时表明ITS基因可以作为一种有效的分子标记用于捻转血矛线虫与羊仰口线虫的鉴定。四、三种药物对山羊消化道线虫和球虫的驱虫效果试验在昆明市阿子营乡一羊场选择20只山羊,分为药物组和阳性对照组2个小组,每组10只羊,药物组每只羊口服阿苯达唑-伊维菌素片,在给药前(第0 d)和给药后第7d、14d、28d,试验羊逐头称重、采集粪便,用麦克马斯特计数法计数EPG值,以虫卵减少率、虫卵转阴率和平均增重评价驱虫效果。结果显示,在第28 d仅有2头羊粪便中检测出虫卵,虫卵减少率为96.6%,虫卵转阴率为80%;给药组平均增重8.6 kg,高于阳性对照组的(8 kg),给药组比对照组多增重0.6 kg。结果显示阿苯达唑-伊维菌素片有良好的驱虫效力,驱虫的经济效益明显。在玉溪市羊街乡(3个养殖场)和那诺乡(1个养殖场)选择4个羊场、238只羊,同一天开始饲喂阿苯达唑-伊维菌素预混剂和地克珠利预混剂,其中阿苯达唑-伊维菌素预混剂连用3d,地克珠利预混剂连用6 d。在给药同一天和首次给药后第14 d,试验羊分别逐头采集粪便,用麦克马斯特计数法分别计数每克粪便EPG值和每克粪便卵囊数,以虫卵减少率、虫卵转阴率评价药物的驱蠕虫效果,以卵囊减少率、卵囊转阴率评价药物防治球虫的效果。结果显示,虫卵减少率与虫卵转阴率均为100%,卵囊减少率、卵囊转阴率分别为99.9%与99.5%。结果显示阿苯达唑-伊维菌素预混剂和地克珠利预混剂有良好驱虫效力。结论:云南省11个市或自治州山羊普遍感染消化道寄生虫,感染的寄生虫种类包括:莫尼茨绦虫、类圆线虫、毛首线虫、毛圆科线虫和7种艾美耳球虫,其中球虫和毛圆科线虫为优势虫种。寄生于云南山羊的血矛线虫属、仰口线虫属线虫分别为捻转血矛线虫、羊仰口线虫。阿苯达唑-伊维菌素片、阿苯达唑-伊维菌素预混剂对山羊线虫,地克珠利预混剂对山羊球虫均有良好的驱虫效果。