【摘 要】
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目的:探讨TGF-β3对体外培养的兔牙髓干细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养,获得DPSCs,光镜下行形态学观察;将体外培养的第3代DPSCs分为5组,分别
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目的:探讨TGF-β3对体外培养的兔牙髓干细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养,获得DPSCs,光镜下行形态学观察;将体外培养的第3代DPSCs分为5组,分别为对照组、20 ng/m L TGF-β3组、40 ng/mL TGF-β3组、80 ng/m L TGF-β3组和100 ng/m L TGF-β3组,分别加入0、20、40、80、100 ng/m L TGF-β3;采用MTT法检测5组DPSCs A490值,采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物OC、COL-I、BSP表达情况,采用茜素红染色检测出现矿化结节情况,并进行比较。结果:兔DPSCs呈集落状生长,在体外有一定克隆形成能力;对照组、20、40、80、100 ng/m L TGF-β3组兔DPSCs A490值分别为0.34±0.55、0.34±0.19、0.33±0.47、0.33±0.30、0.34±0.47,各组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05);80、100 ng/m L TGF-β3组诱导后第3天出现COL-I阳性表达,第7天开始消失,第5~7天出现BSP阳性表达,第7~14天出现OC阳性表达,第7天出现矿化结节;40 ng/m L TGF-β3组第5~7天均有COL-I阳性表达,第7天出现BSP阳性表达,第14天出现OC阳性表达,第14天出现矿化结节;20 ng/m L组第7天出现COL-I阳性表达,第14天消失,第14天出现BSP阳性表达,第21天出现OC阳性表达,第21天出现矿化结节;对照组COL-I、BSP和OC均为阴性,未出现矿化结节。结论:TGF-β3对体外培养的兔DPSCs增殖无影响,但对兔DPSCs向成骨细胞分化能力有一定促进作用,并在一定范围内呈浓度依赖关系。
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