【摘 要】
：
[目 的]抑制素家族（Prohibitins,PHBs）包括抑制素-1（Prohibitin-1,PHB-1）和抑制素-2（Prohibitin-2,PHB-2）,在结构上相对保守,且在细胞核、细胞膜、细胞质以及线粒体等多种亚细胞结构中普遍表达。其功能与不同的亚细胞定位相关,可参与细胞周期、线粒体的结构和功能、基因转录以及信号传导的调节等。PHB-1和PHB-2还参与了机体内p53、AKT、RAF
【基金项目】
：
云南省应用基础研究（2017FE467-162）；
论文部分内容阅读
[目 的]抑制素家族（Prohibitins,PHBs）包括抑制素-1（Prohibitin-1,PHB-1）和抑制素-2（Prohibitin-2,PHB-2）,在结构上相对保守,且在细胞核、细胞膜、细胞质以及线粒体等多种亚细胞结构中普遍表达。其功能与不同的亚细胞定位相关,可参与细胞周期、线粒体的结构和功能、基因转录以及信号传导的调节等。PHB-1和PHB-2还参与了机体内p53、AKT、RAF、Rb、E2F等多种信号通路的调控,其在各系统疾病尤其是肿瘤疾病的发生发展中起重要作用。目前,肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,在病理学上主要将其分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌两种类型,其中最常见的是非小细胞肺癌,鳞癌是其中最主要的类型。研究发现,PHBs在众多的肿瘤中,例如胃癌、前列腺癌、乳腺癌、食管癌、结直肠癌、膀胱癌等中的表达都存在异常。在我们前期的研究中发现,PHB-1在非小细胞肺癌组织中及转移到淋巴结内的癌细胞中表达显著增高。在本次研究中,我们选择肺鳞癌细胞来进一步研究PHB-1的差异表达对其生长、增殖、迁移、侵袭等方面的影响。同时探索其可能的作用机制,这将为肺鳞癌的早期诊断和靶向治疗等方面的研究提供新的思路和方法。[方 法]利用质粒转染进入肺鳞癌细胞系SK-MES-1来构建PHB-1低表达和过表达的SK-MES-1细胞系,并通过实时荧光定量核酸扩增检测系统（Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR）来验证培养、传代后SK-MES-1细胞系中PHB-1表达的稳定性。以未转染的SK-MES-1细胞作为对照组,通过细胞增殖实验（Cell Counting Kit-8,CCK-8）,来探索PHB-1的表达对细胞增殖能力的影响;通过细胞划痕实验,来研究PHB-1的表达对细胞迁移能力的影响;通过Transwell细胞体外侵袭实验,来研究PHB-1的表达对细胞侵袭能力的影响。通过酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒来检测MMP-1、AKT、细胞外调节蛋白激酶（Extracellular Regulated Protein Kinases,ERK）以及转化生长因子-β（Transforming Growth Factor-β,TGF-β）等因子的表达来初步探索PHB-1在肺鳞癌细胞中发挥作用的可能机制。通过透射电镜观察三种细胞的内部结构以探索PHB-1对细胞超微结构的影响。最后,拟构建裸鼠模型,在动物水平探究PH]B-1的差异表达对肺鳞癌生长的影响。[结 果]1.质粒转染SK-MES-1细胞,构建PHB-1低表达和过表达的细胞系,通过qPCR实验验证了 SK-MES-1细胞在反复培养和传代后其PHB-1的表达仍然很稳定;2.与未转染的SK-MES-1细胞（对照组）相比较,PHB-1的表达增高可以进一步加强SK-MES-1细胞增殖、迁移和侵袭的能力;3.PHB-1的表达降低显著地减弱了 SK-MES-1细胞增殖、迁移和侵袭的能力;4.在PHB-I过表达的SK-MES-1细胞上清液中,AKT和MMP-1蛋白的表达与对照组相比明显增高,但其TGF-β的表达则有所降低;在PHB-1低表达组细胞上清液中AKT和MMP-1蛋白的表达与对照组相比有所降低,而TGF-β表达则有明显上调,三组中ERK的表达没有明显的区别;5.透射电镜观察细胞可发现PHB-1低表达组的细胞内可见明显的线粒体溶解和内质网扩张,而对照组和过表达组的细胞内部结构没有明显异常;6.裸鼠的成瘤模型未能成功构建。[结 论]1.PHB-1过表达后细胞增殖能力增强,低表达后细胞增殖能力减弱,可能与AKT和TGF-β的激活或抑制相关。2.PHB-1过表达后细胞迁移能力增强,低表达后细胞迁移能力减弱,可能与MMP-1的蛋白表达相关。3.PHB-1的表达与肺鳞癌细胞体外侵袭能力相关。4.PHB-1的表达抑制后,SK-MES-1细胞增殖、迁移、侵袭能力的降低可能与线粒体、内质网等亚细胞结构的改变相关。
其他文献
[目 的]评价无创模型筛选丙氨酸氨基转移酶正常的慢性乙型肝炎病毒感染者中需要抗病毒治疗对象的效能。筛选需要抗病毒治疗人群的独立危险因子,探索高效的无创诊断模型,为临床无创模型筛选合适的抗病毒治疗患者提供理论依据。[方 法]收集2014年4月至2020年1月在昆明医科大学第一附属医院感染科住院的丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase,ALT）正常并完成肝穿刺活检的慢性乙型
[目的]信号素4D即轴突导向因子Semaphorin4D可简写为Sema4D,也称CD100,其在多种类型的肿瘤组织中异常高表达,并在肿瘤的周期、凋亡、侵袭转移、增殖、促血管发生及血管生成拟态起着重要的作用。但是,关于信号素4D对急性白血病的影响的研究报道很少。本研究从运用肿瘤数据库的方法检索Sema4D对各种肿瘤的影响然后结合试验的方法检测Sema4D在急性白血病患者中的表达情况,通过构建的慢病
[目的]应用光学相干断层扫描血管成像技术（Optical Coherence Tomography Angiography,OCTA）测量无病理性改变近视患者的视网膜、脉络膜系统黄斑相关微血管参数,对比高度近视与中低度近视之间的差异,并进一步评估其结构与功能间的相关性。[方法]招募2019年8月至2021年3月于昆明医科大学第一附属医院眼科门诊就诊的无病理性改变的高度近视的患者进入队列研究进行基线
[目 的]本课题通过对云南省肿瘤医院存档的口咽鳞癌病理标本进行HPV DNA测定,获得其HPV 阳性率,并从临床病理特征、预后等方面进行回顾性总结分析,充实中国地区关于HPV与口咽鳞癌相关性的研究资料;同时探究AJCC第7版及第8版分期对口咽鳞癌预后评估的价值。[方 法]选择2010年1月至2019年12月在云南省肿瘤医院诊治并符合入组标准的129例口咽癌患者作为研究对象,收集详细临床资料及病理标
[目的]宽QRS波心动过速（wide QRS complex tachycardia,WCT）鉴别诊断是临床工作的难点,室速约占其中的80%。房室分离作为室速最具特异性的诊断标准之一,在标准12导联心电图（electrocardiogram,ECG）中仅约30%的宽QRS波心动过速病例可发现房室分离。Lewis导联（Lewis lead）能够增加房颤时P波的振幅,目前仅有其用于宽QRS波心动过速鉴
[目 的]探讨同型半胱氨酸（Hcy）、胱抑素C（Cyc-c）与2型糖尿病（T2DM）患者骨密度的相关性,Hcy以及Cys-C是否对T2DM患者的骨密度改变有预测作用。[方 法]根据纳入标准及排出标准选取2020年在昆明市延安医院内分泌科住院的T2DM患者317例,收集一般资料（性别、年龄、身高、体重）,并于前一日晚22点后禁食,次日早8点空腹抽血,送血至检验科检验血Hcy、Cys-C及糖化血红蛋白
[目 的]本研究通过分析肌钙蛋白Ⅰ（cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ）联合随机森林模型（random forest,RF）预测急性 A 型主动脉夹层（acute type A aortic dissection,ATAAD）破裂的应用价值,旨在尽早筛选出破裂风险较大的ATAAD患者,通过积极的手术治疗,降低ATAAD患者死亡风险,提高ATAAD患者的生存率。[方 法]本研究通过回顾
[目的]本研究拟通过评估吲哚胺2,3-双加氧酶1（Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1）的表达,分析其与临床病理资料、生存数据及肿瘤免疫微环境之间的关系,以确定 IDO1 在上尿路尿路上皮癌（Upper tract urothelial carcinoma,UTUC）中的预后价值。并进一步构建基于IDO1表达的免疫分类器,为肿瘤预后预测、个性化免疫治疗提供科学依据。
[目 的]术后认知功能障碍（POCD）是患者术后常见的中枢神经系统并发症,导致患者记忆、语言及社会活动能力等明显下降。POCD一旦发生难以被彻底治愈,可从早期认知障碍进展为长期甚至永久性,严重影响患者生存质量,因此早期识别并及时防治尤为重要。明确早期POCD的特异性生物化学标志物与相关危险因素,能够早期快速预测POCD的发生,根据危险性对患者分层,并及时采取措施干预疾病的发生发展,从而更好地防治P
目的:探讨胆道125Ⅰ粒子支架与普通金属裸支架治疗胆管癌并梗阻性黄疸的临床疗效及安全性。方法:回顾性分析我科自2010年1月至2018年6月连续性收治的51例由胆管癌引起的Bismuth-Corlette分型为Ⅰ型和Ⅱ型的恶性胆道梗阻患者,按照植入支架类型不同分为粒子支架组(植入125Ⅰ粒子支架)和普通支架组（植入普通金属裸支架）,最终粒子支架组纳入25例,普通支架组纳入26例,收集每个患者术前及