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目的观察不同种类、不同浓度的脂肪酸对3T3-L1成熟脂肪细胞胰岛素刺激状态和ASP刺激状态下细胞炎症因子(IL-6、TNF-α、MCP-1、MIP-1α)分泌水平的影响,以及对细胞炎症信号因子(JNK1、IKKβ)蛋白表达的影响,以探讨ASP对脂肪细胞炎症反应的调节作用。方法1、采用经典的激素“鸡尾酒”法(诱导培养基由10μg/ml胰岛素、0.5 mmol/L 1-甲基3-异丁基黄嘌呤和1.0μmol/L地塞米松配置而成),将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为3T3-L1成熟脂肪细胞,倒置显微镜下观察3T3-L1前脂肪细胞的形态学变化,油红O染色观察脂滴的聚集。2、3T3-L1成熟脂肪细胞给予油酸、棕榈酸孵育过夜后,采用ELISE方法检测ASP刺激以及胰岛素刺激的IL-6、TNF-α、MCP-1、MIP-1α分泌水平。3、3T3-L1成熟脂肪细胞给予油酸、棕榈酸孵育过夜后,采用Western Blot法检测ASP刺激以及胰岛素刺激的JNK1、IKKβ蛋白表达。结果1、3T3-L1前脂肪细胞表现为成纤维细胞样的长梭形,胞浆中无脂滴;分化成熟后,细胞变圆、变大,可见明显的脂滴围绕胞核,呈典型“戒环”形状。2、在脂肪酸诱导的胰岛素抵抗状态下,ASP可以从不同程度上抑制IL-6、TNF-α、MCP-1、MIP-1α分泌。油酸组显著下调57% MIP-1α的分泌(P<0.05,1.0 mmol/L ),棕榈酸组显著抑制50%IL-6的分泌(P<0.05,1.0 mmol/L )和48% TNF-α的分泌(P<0.05,1.0 mmol/L )。高浓度的油酸和棕榈酸可以明显抑制ASP刺激的JNK1蛋白表达,轻度抑制IKKβ的表达。油酸组JNK1的表达下降34%(P<0.05,1.0 mmol/L),棕榈酸组下降54%(P<0.01,1.0 mmol/L)。3、在脂肪酸诱导的胰岛素抵抗状态下,胰岛素刺激的3T3-L1脂肪细胞IL-6、TNF-α、MCP-1的分泌随FFA浓度的升高呈下降趋势,油酸组显著增强MIP-1α的分泌178% (P<0.05,1.0 mmol/L ),棕榈酸组显著抑制37% MCP-1(P<0.05,1.0 mmol/L )和51% TNF-α分泌(P<0.05,1.0 mmol/L )。与ASP刺激不同的是,胰岛素刺激状态下,油酸、棕榈酸不影响JNK1和IKKβ的表达。结论在脂肪酸诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗状态下,ASP在一定程度上抑制炎症因子分泌,而且还参与调节JNK、IKK/NF-κB信号通路中重要信号分子的功能, ASP参与了脂肪细胞脂毒性-炎症反应的调控。