金黄色葡萄球菌肠毒素B联合卵清蛋白诱导嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎的实验研究

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目的:探讨用金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)联合卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导小鼠嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎。方法:将56只BALB/c雌性小鼠随机分为A、B、C、D、E共5组,A、B组各10只,C、D、E组各12只。A组(空白组):不予任何处理。第0天和第5天,B、C两组经腹腔注射0.2mL磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS);D、E两组经腹腔注射0.2mL含25μg OVA及2mg氢氧化铝的混悬液。第12天至第18天,B、C两组每天一次予PBS滴鼻;D、E两组每天一次予3%OVA溶液滴鼻。第19天至第46天共4周,B、C两组每周3次予PBS滴鼻;D、E两组每周3次予3%OVA溶液滴鼻。第47天至第103天共8周,B、C、D组每周3次分别予PBS、SEB、3%OVA溶液滴鼻;E组则予3%OVA溶液和SEB溶液滴鼻,两者间隔0.5小时。第104天处死小鼠。组织切片苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosinstaining,HE染色)后观察各组小鼠鼻腔鼻窦黏膜组织的形态学改变。使用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠鼻腔鼻窦黏膜组织中γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-5、IL-17A的表达水平。各实验所得数据采用SPSS 25.0统计学软件进行分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:A、B两组小鼠鼻腔鼻窦黏膜上皮完整,黏膜内及黏膜下未见明显炎性细胞浸润;C组鼻腔鼻窦黏膜上皮结构基本完整,见少许炎性细胞浸润及散在嗜酸性粒细胞;D组鼻腔鼻窦黏膜上皮增厚,可见少量嗜酸性粒细胞浸润,未见明显的上皮破溃脱落和息肉样病变;E组鼻腔鼻窦黏膜内及黏膜下见大量炎性细胞浸润,且嗜酸性粒细胞较多,同时可见息肉样病变,局部上皮见破溃脱落。经统计学分析,E组鼻腔鼻窦黏膜嗜酸性粒细胞及息肉样病变计数明显多于其他四组,差异有统计学意义(P<0.05);E组鼻腔鼻窦黏膜组织中IL-4及IL-5高表达,与另外四组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。D组IL-4、IL-5表达水平也显著增高,与A、B及C三组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。五组之间IFN-γ及IL-17A的表达水平差异无明显统计学意义。结论:本实验通过用SEB联合OVA促进小鼠鼻腔鼻窦黏膜息肉样病变形成、嗜酸粒细胞浸润以及Th2细胞因子高表达,提示OVA联合SEB可成功诱导小鼠嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴Th2型免疫反应。
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