异养硝化菌的脱氮活性及其功能基因的研究

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随着经济的飞速发展,科学技术的不断进步,工农业及人类对自然环境的污染也日益加剧。其中,污染物排放中所含氮化合物也不断增加,逐渐成为环境污染的关键因素。水中氮污染会引起水体富营养化、水生动物死亡、水质破坏等现象,空气中氮污染会破坏臭氧层、危害人类健康,土壤氮污染会使农作物受到损害进而也会污染到水体及人类的生存。总之,氮污染会严重影响我们赖以生存的自然环境。   伴随着氮污染危害的不断加剧,许多学者针对氮污染技术做了很多研究,目前的脱氮技术主要包括传统的硝化-反硝化过程,同步硝化反硝化过程,好氧反硝化过程和厌氧氨氧化过程等技术,其中涉及的微生物非常丰富,有自养氨氧化菌,异养氨氧化菌,厌氧氨氧化菌等,这些微生物在脱氮过程中起着关键作用,而异养硝化菌的脱氮效果尤为显著,其脱氮过程快速,而且廉价高效,具有很好的实用性,可以很好的应用到实际工程中。   本文从三种生境中分离异养硝化菌株,分别为普通河水、自然湿地和含高氨氮的养猪场废水,结果只从富民养猪场污水池中驯化分离出了异养硝化菌株,鉴定为粪产碱菌,说明在高氨氮废水中异养硝化菌的存在的数量更大,更容易分离到。本文以氯化铵和乙酸钠为碳氮源,研究其硝化活性,通过六天的氮指标检测,菌株L14和L90都有脱氮除碳的作用。其中,L14的氨氮去除率达到97.72%,L90的氨氮去除率达到95.66%;L14和L90对COD去除率分别达到91.05%和86.63%。通过实验检测发现中间产物亚硝酸盐和硝酸盐积累很少,说明菌株能很快进行反硝化,具有很好的反硝化功能。本文通过分子生物技术对分离到的粪产碱菌的部分功能基因进行检测,检测到了编码N20还原酶的nosZ功能基因,编码亚硝酸还原酶的nirK功能基因和nirS功能基因;amo功能基因也未检测到,说明该菌株不含有引物amo-1F/amo-2R的目的基因;nor功能基因未检测到,这与引物选取及PCR条件等很多因素有关,有待进一步研究。   综上所述,可以看出本文分离出的菌株L14和L90有很好的脱氮除碳作用,对于含高C/N的废水有良好的去除作用,这对实际工程的应用有很好的贡献;同时检测了它们的功能基因,在分子水平上是一个突破。
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