【摘 要】
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外泌体作为一种纳米级膜小泡,广泛存在于人体体液中。相较于传统的体液活检材料,如循环肿瘤细胞、无细胞DNA,外泌体具有多种优越性,是理想的体液活检材料,在临床诊断及术后监测中具有很大的价值。但现有的外泌体分离提取技术,限制其在诊断领域的推广和应用。本研究通过水热法成功合成CaTiO3/Al3+/Pr3+/Sm3+材料并进行相关材料的表征。为了探究材料的可行性,该材料被应用于人血清外泌体的富集分离并对
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外泌体作为一种纳米级膜小泡,广泛存在于人体体液中。相较于传统的体液活检材料,如循环肿瘤细胞、无细胞DNA,外泌体具有多种优越性,是理想的体液活检材料,在临床诊断及术后监测中具有很大的价值。但现有的外泌体分离提取技术,限制其在诊断领域的推广和应用。本研究通过水热法成功合成CaTiO3/Al3+/Pr3+/Sm3+材料并进行相关材料的表征。为了探究材料的可行性,该材料被应用于人血清外泌体的富集分离并对富集条件进一步优化。结果显示,最优的富集条件下,与超速离心法所获外泌体相比,5 mg材料与100μL人血清孵育10 min,得率达到94.7%。此外,分析显示Al3+、Pr3+和Sm3+这三种元素中,Al3+在外泌体分离中起重要作用。与已报道的外泌体富集材料Ti O2相比,CaTiO3/Al3+/Pr3+/Sm3+材料对人血清中外泌体的富集能力更强,且富集到的外泌体纯度更高。材料富集能力稳定性评估实验显示,该材料重复使用三次对富集效率无显著影响,稳定性好。该复合材料的实用性在阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease,AD）患者血清外泌体的富集中得到进一步检测。将该材料富集的外泌体,通过双向电泳分离结合质谱分析,尝试筛选AD潜在的血清外泌体标志蛋白。结果显示,健康对照组中鉴定到17个蛋白质,AD组中鉴定到21个蛋白质,6个蛋白质的表达量具有明显差异。其中AD组中5个表达上调,1个表达下调。上调蛋白中Serum amyloid P-component precursor可能与AD的病理学有关。总之,该材料制备简单,操作简便快速,从人血清中富集到的外泌体不仅得率高,且纯度好。在临床疾病诊断和术后监测中具有很大的应用潜力。
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