活血化瘀方剂对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的干预作用

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研究背景及目的:特发性肺纤维化是一种不明原因引起的慢性、不可逆的间质性肺疾病,病理学表现为寻常型间质性肺炎,目前尚无有效的治疗手段。因此寻找可行的治疗方法迫在眉睫。祖国传统医学将肺纤维化归为“肺痹”、“肺胀”等范畴,对症予活血化瘀法治疗,取得了一定的疗效。故课题希望通过实验证实活血化瘀法干预纤维化的有效性,评估中西医结合治疗可否进一步改善纤维化治疗效果,并初步探讨活血化淤方剂防治纤维化可能的作用机制。方法:50大鼠随机分为5组:①正常对照组(CTRL组);②博莱霉素模型组(BLM组);③中药复方组(CH组);④吡非尼酮组(PF组);⑤中药复方-吡非尼酮联合组(CP组)。正常对照组气管内滴注生理盐水对照,其余各组复制博莱霉素致大鼠纤维化模型。①②组生理盐水灌胃对照,③④⑤组分别予活血化淤方剂12g/kg/天,吡非尼酮50mg/kg/天,以及两者联合灌胃,分早晚2次灌入。28天时处死大鼠,留取标本。通过组织病理学的方法评估纤维化程度:测量肺系数,HE切片染色评分,MASSON切片染色光密度分析。应用分子生物学的方法检测可能的作用通路和靶点:Western blot法检测肺组织ALK5、Smad2/3、EGFR的表达,TBA法检测MDA的含量。结果:纤维化程度的判断:造模后第28天各组大鼠的肺系数组别肺系±数s与CTRL组比较与BLM组比较各组间比较P P F PCTRL组0.424±0.023-0.003BLM组0.749±0.1410.003-CH组0.824±0.0940.0010.7595.2260.003PF组0.757±0.0800.002>0.999CP组0.753±0.1740.002>0.999造模后第28天各组大鼠的肺HE染色评分组别HE染色评分对比CTRL组对比BLM组对比CP组各组间比较M(Q1,Q3) P P P PCTRL组0.00(0.00,0.25)-<0.0010.007BLM组4.00(3.00,6.25)<0.001-<0.001CH组3.00(1.75,4.00)<0.0010.0390.035<0.001PF组2.50(1.75,4.00)<0.0010.0320.043CP组1.50(0.75,3.00)0.007<0.001-造模后第28天各组大鼠的肺Masson染色积分光密度组别积分光密度对比CTRL组对比BLM组对比CP组各组间比较P P P PCTRL组0.007±0.000-<0.001<0.001BLM组0.153±±0s.150<0.001-<0.001CH组0.106±0.016<0.001<0.001<0.001<0.001PF组0.074±0.007<0.001<0.001<0.001CP组0.050±0.013<0.001<0.001-可能的作用靶点:造模后第28天各组大鼠肺MDA的含量组别吸光±度s对比CTRL组对比BLM组对比CP组各组间比较P P P PCTRL组0.597±0.067-<0.0010.584BLM组1.493±0.190<0.001-<0.001CH组0.914±0.1190.0230.0010.060<0.001PF组1.001±0.1580.0060.0020.017CP组0.663±0.1580.584<0.001-±s造模后第28天各组大鼠肺ALK5的相对表达量组别内参校正光密度对比CTRL组对比BLM组对比CP组各组间比较P P P PCTRL组1.00±0.00-<0.0010.135BLM组3.39±0.30<0.001-<0.001CH组2.16±0.15<0.001<0.001<0.001<0.001PF组2.21±0.100.135<0.001<0.001CP组1.25±0.24<0.001<0.001-造模后第28天各组大鼠肺Smad2/3的相对表达量组别内参校正光密度对比CTRL组对比BLM组对比CP组各组间比较P P P PCTRL组1.00±0.00-<0.0010.971BLM组2.87±±s0.40<0.001-<0.001CH组1.51±0.410.0880.0010.083<0.001PF组1.33±0.470.258<0.0010.245CP组0.99±0.080.971<0.001-造模后第28天各组大鼠肺EGFR的相对表达量组别内参校正±光s密度对比CTRL组对比BLM组对比CP组各组间比较P P P PCTRL组1.00±0.00-<0.0010.989BLM组2.67±0.40<0.001-<0.001CH组1.43±0.410.089<0.0010.087<0.001PF组1.22±0.160.365<0.0010.358CP组1.00±0.210.989<0.001-结论:活血化淤方剂可改善大鼠的肺纤维化,同时与吡非尼酮联合应用可以提高治疗效果。活血化淤方剂作用机制可能是通过降低ALK5、Smand2/3、EGFR的表达,减轻肺组织MDA,达到多靶点抗纤维化作用。目的:探讨间质性肺疾病(ILD)的症状、体征、影像学表现等临床特征,提高医务人员对间质性肺疾病的认识,更好地服务诊疗。方法:回顾性分析2013年8月-2013年12月进入大连医科大学附属第一医院呼吸内科住院治疗的间质性肺疾病患者21人,分析其症状、体征、影像学表现、血气分析结果,寻找其特点。结果:21例间质性肺疾病患者主要为中老年,发病构成主要以COPD合并ILD、特发性肺间质纤维化(IPF)、结缔组织病合并ILD较多见,其余少见。绝大部分有不同程度的咳嗽,大部分也都出现了胸闷、呼吸困等临床表现。体征中,Velcro啰音最为常见。影像学特征以网格影出现频率最高,且主要分布于双肺下叶膈肌附近及近胸膜处。血气分析提示患者均有不同程度的组织缺氧。肺功能检查均提示了不同程度的肺功能受损,主要表现为混合性通气功能障碍,同时一氧化碳弥散量明显减少。结论:大多数间质性肺疾都有典型的临床表现,医护人员应当提高对对间质性肺疾病的认识,完善辅助检查,提高诊治效果。
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