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本论文主要从材料选择、激素调节、C/N调节、去顶、低温诱导等因素研究了金钗石斛和细茎石斛两种实生苗的试管开花。研究结果如下: 金钗石斛种子经1/2MS+NAA0.4mg/L的诱导分化后,实生苗分别经单因子激素ABA、PP333、TDZ处理,均有花芽出现,但花芽诱导率(花芽数/植株数)低,ABA、PP333处理开正常花,而TDZ处理均不能开正常花。 提高C/N比和P、K的含量,促进花芽的形成。挑选种子实生苗经“1/2MS+NAA0.5mg/L+PP3330.3mg/L”预处理4个月后,转接到“1/2N×2P×2K+PP3330.8mg/L+TDZ0.08mg/L”培养基中一直培养,90d内统计,花芽诱导率高达95.5%,但正常花开放水平低;培养25d后,再转瓶到无外源激素附加的1/2MS培养基中,花芽诱导率降低到55.5%,但正常花开放率(开花数/花芽数)明显提高,达51.9%。 为了进一步提高正常花开放率,选择上述携有2~3个新芽的预处理实生苗,并将新芽茎尖直接接触或插入“1/2N×2P+PP3330.5mg/L+TDZ0.05mg/L”培养基中,培育25d后,置于人工气候箱T23℃/18℃低温诱导45d,移出后60d内观察,花芽从培养基中长出,花蕾大,花器官完整,花芽率和正常花开放率分别为45.3%、80.9%。但原开花苗基部的新芽继续低温诱导,正常花开放率明显降低。 金钗石斛种子实生苗经“PP333+ABA”预处理,同样有利于花芽的形成。经实验筛选出适宜诱导花芽和正常花开放的方案,最佳花芽诱导配方为:“MS+PP3330.8mg/L+ABA1.0mg/L”中预处理35d后,转入“1/2N×2P×2K+PP3331.2mg/L+TDZ0.12mg/L”中,90d内花芽诱导率高达97.8%,但正常花开放率较低;最佳正常花开放培养基:“MS+PP3331.2mg/L+ABA1.0mg/L”中培养35d后,转入“1/2N×2P×2K+PP3330.8mg/L+TDZ0.08mg/L”中,90d内花芽诱导率和正常花开放率分别为42.0%,72.0%。但实生苗经“PP333+ABA”预处理35d后,剪去茎尖仅用含TDZ的1/6N×2P×2K培养基单独诱导不利于花芽的正常发育。 在类似条件下,细茎石斛种子经“1/2MS+NAA0.2mg/L”培养的实生苗更容易诱导花芽的形成和正常花开放。研究结果表明:分别加入不同浓度的“PP333+ABA”或TDZ单独预处理幼苗后,再转入相同浓度的“PP333+TDZ”培养基中培育,