论文部分内容阅读
目的1.通过免疫组化检测FOXO1及其下游分子KLF2、S1P1在胸腺瘤合并重症肌无力(MG)、胸腺增生、单纯胸腺瘤、正常胸腺中不同组织的表达情况,并了解在四种不同组织中表达的临床意义。2.在胸腺瘤合并肌无力患者中检测FOXO1、及其下游分子KLF2、S1P1,分析其与病程、年龄、性别、组织类型、临床分期、AchR-Ab等因素的关系。3.探讨foxo1-klf2-s1p1信号轴在组织标本中表达的相关性,分析其与疾病发生的关系。方法1.运用免疫组化法(SP法)通过免疫组化发了解FOXO1及其下游信号分子KLF2、S1P1在不同胸腺切片组织中的表达。其中22例胸腺瘤合并MG、5例胸腺增生、7例单纯胸腺瘤和4例正常胸腺组织。2.应用实时荧光定量PCR,检测FOXO1、KLF2、S1P1在不同胸腺组织中mRNA的表达水平。3.运用统计学软件SPSS22.0分析FOXO1、KLF2、S1P1在不同胸腺组织中的表达情况与各相关因素的相关性。结果1.FOXO1在胸腺瘤合并MG、胸腺增生、单纯胸腺瘤患者组织中表达均呈阳性,阳性率分别为77.3%(17/22)、80%(4/5)、42.8%(3/7);在正常胸腺中为25%(1/4)。在胸腺瘤合并MG中,FOXO1表达明显高于单纯胸腺瘤(P<0.05),而与胸腺增生伴MG组织中无明显差异(P>0.05)。在胸腺瘤合并MG中,FOXO1主要表达于髓质岛及周围;而在胸腺增生组织中主要表达于皮质和髓质区的细胞核及胞浆中,以细胞核为主;正常胸腺组织中散在表达。2.KLF2在胸腺瘤合并MG、胸腺增生、单纯胸腺瘤患者组织中表达均呈阳性,阳性率分别为86.3%(19/22)、100%(5/5)、57.1%(4/7);在正常胸腺组织中表达率为25%(1/4)。在胸腺瘤合并MG中,KLF2表达明显高于单纯胸腺瘤(P<0.05)和正常胸腺组织(P<0.05),而与胸腺增生伴MG组织中无明显差异(P>0.05)。在胸腺瘤合并MG中,KLF2主要表达于髓质岛及周围,细胞胞浆中表达较多;而在胸腺增生中主要表达于皮质、皮髓交界和髓质区;正常胸腺组织及中散在表达。3.S1P1在胸腺瘤合并MG、胸腺增生、单纯胸腺瘤患者组织中表达均呈阳性,阳性率分别为81.8%(18/22)、80%(4/5)、42.8%(3/7);正常胸腺中则低表达;在胸腺瘤合并MG中,S1P1表达高与正常胸腺组织表达有显著差异(P<0.05),而与胸腺增生伴MG组织中无明显差异(P>0.05)。在胸腺瘤合并MG中,S1P1主要分布于髓质岛及血管周围间隙;而在胸腺增生组织标本中主要分布在髓质区;正常胸腺组织散在表达。4.在胸腺瘤合并MG组织在中,三种蛋白相对表达量分别为4.32±0.86、3.58±0.86 4.06±0.67。在单纯胸腺瘤中,三种蛋白相对表达量分别为5.99±1.50、、5.72±0.89、5.85±1.25。在胸腺增生中,三种蛋白相对表达量分别为4.38±0.25、、4.18±0.55、4.23±0.476。在胸腺瘤合并MG中,FOXO1、KLF2、S1P1的mRNA相对表达量均高于单纯胸腺瘤(P<0.05)。5.对FOXO1、KLF2、S1P1进行相关性分析,FOXO1与KLF2在胸腺瘤合并MG组织中表达存在相关关系(γ=0.497,P=0.019<0.05),见图16。FOXO1与S1P1胸腺瘤合并MG组织中表达存在相关关系(γ=0.481,P=0.043<0.05),见图16.1。KLF2与S1P1胸腺瘤合并MG组织中表达不存在相关关系(γ=4.286,P=0.143>0.05),见图16.2。6.FOXO1、S1P1、KLF2的表达与病程、年龄、性别、组织类型、临床分期AchR-Ab等因素之间未见明显相关性。结论1.FOXO1、KLF2、S1P1在胸腺瘤合并MG和胸腺增生合并MG患者中表达水平增高,说明其与MG发病机制可能与foxo1-klf2-s1p1信号轴影响胸腺细胞异常输出有关。2.FOXO1、KLF2、S1P1在胸腺瘤与胸腺增生中蛋白表达位置不同,表明两者引起重症肌无力的原因可能不同。3、胸腺瘤合并MG中,FOXO1及下游分子KLF2、S1P1的mRNA比单纯胸腺瘤的相对表达量要高,表明foxo1-klf2-s1p1信号轴可能影响胸腺细胞的异常输出,并调控外周其他T细胞亚群的数量。