大麦花药培养及抗黄花叶病的转基因研究

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目前,对大麦黄花叶病还没有专门的化学药剂防治,唯一的方法是培育抗性新品种.根据常规育种选育抗性品种,所需年限太长.运用细胞工程和基因工程技术培育抗BaYMV和BaMMV的大麦新株系是遗传育种的新途径,具有针对性强等优点.因此,国内外许多实验室都致于研究转基因受体系统的建立和利用cp基因等病毒基因介导抗性的转基因研究.该文主要研究了:(1)不同相对湿度的低温预处理对大麦花药出愈率的影响;(2)低温处理愈伤组织对植株分化的影响;(3)高频快速建立大麦胚性悬浮细胞系;(4)不同培养基对幼胚愈伤组织诱导的影响;(5)基因枪的不同轰击压力对幼胚绿苗率的影响;(6)用基因枪法将BaYMV和BaMMV的cp基因导入三种不同受体材料.结果表明,较大相对湿度的低温预处理能明显促进花药的出愈率;适宜的低温处理愈伤组织(24-48小时)能提高绿苗率;以7周龄的花药胚性愈伤组织为起始材料高频快速建立了均质、分散性好的胚性悬浮细胞系,早3和沪4的建立频率分别约为50%和25%,1克鲜重悬浮细胞系;在MS、CC和AA三种培养基中,幼胚在MS、CC诱导培养基中,出愈率较高,出芽率相对较低,1mm左右的小胚的出愈率比2mm的大胚要高;用不同轰击压力900psi,1100psi和1300psi轰击幼胚,以1300psi的轰击压力对绿苗率的影响最大;用基因枪法将BaYMVT BaMMA的cp基因导入悬浮细胞、花粉愈伤和幼胚三种受体材料中,并最终获得12株再生植株.该文还在大麦花药预处理的作用机制,花药培养和游离小孢子培养及禾谷类花粉白苗苗频发生的分子机理进行了综述;另外,还对基因枪轰击压力(psi)、三种受体材料和转基因植株再生等问题进行了讨论.
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