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目的:上皮性卵巢癌(以下简称卵巢癌),在女性生殖系统恶性肿瘤中发病率仅次于宫颈癌和宫体癌,居第三位,死亡率却居第一位,严重威胁着妇女的健康。卵巢癌早期症状不明显,70%～80%的患者就诊时已是晚期,晚期卵巢癌患者五年生存率仅为20%～30%。但是早期卵巢癌经有效治疗后,其五年生存率可高达90%。因此,提高卵巢癌的早期诊断水平对于改善卵巢癌预后有重要意义。本研究采用酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法检测卵巢癌患者、良性上皮性卵巢肿瘤患者、女性健康志愿者的血清中HE4、CA125的表达水平,对卵巢癌患者中不同临床分期、不同病理类型、不同病理分级血清中HE4水平进行分析。分析行理想肿瘤细胞减灭术的卵巢癌患者术前、术后血清中HE4的表达水平,并与同源血清中CAl25水平进行比较,探讨HE4作为肿瘤标志物与CAl25联合检测,用于卵巢癌早期诊断、治疗效果评价的价值。方法:选择2008年1月份至2010年7月份白求恩国际和平医院妇产科收治住院的卵巢癌初治患者和良性上皮性卵巢肿瘤患者,所有患者均经术后病理确诊。其中卵巢癌44例,良性上皮性卵巢肿瘤56例,女性健康志愿者40例。无菌抽取上述患者、健康志愿者空腹外周血3～4ml,置于促凝剂真空采血管。静置约1小时待充分凝固,以4℃,3000r/min,离心15min,吸取上清液装入无菌EP管中,贮存于-20℃冰箱保存待测。1采用瑞典康乃格(ConAg)公司生产的HE4试剂盒,用酶联免疫吸附(Enzyme-1inked Immunosorbent Assay, ELISA)双抗体夹心法检测上述血清中HE4的含量。2各组血清CA125浓度由白求恩国际和平医院生殖遗传中心采用化学发光法常规测得。3以女性健康志愿者和良性上皮性卵巢肿瘤组作参照人群,绘制ROC曲线获得界值点,计算血清HE4在诊断卵巢癌中的灵敏度及特异度。比较血清中单独HE4检测与HE4联合CAl25检测在卵巢癌诊断中的价值。4统计学方法:数据结果以(中位数,四分位数间距)表示,应用SPSS13.0统计学分析软件进行统计学处理,分别进行组间计数资料比较、组间计量资料比较、诊断效能评价。双侧检验P<0.05认为有显著性差异。结果:1卵巢癌组、良性上皮性卵巢肿瘤组、女性健康志愿者组的组间比较:这三组血清中HE4的浓度分别为(373.3 pM,137.3 -771.1 pM)、(43.2 pM, 34.0-52.1 pM)、(50.4 pM,46.4-52.3 pM),三组间血清中HE4水平比较采用多样本秩和检验,K-W检定方法(Kruskal-Wallis H Test),χ2=64.5,P<0.001,差异有统计学意义。其中卵巢癌组外周血清HE4水平明显高于良性上皮性卵巢肿瘤组,Wilcoxon秩和检验(Wilcoxon rank sum test)统计量(z=-7.15,P<0.001)及女性健康志愿者组(z=-6.09,P<0.001),差异有统计学意义。2卵巢癌组中不同病理类型间血清HE4水平比较:各组血清HE4浓度分别为浆液性癌组(643.0 pM,346.2-1077.3 pM)、粘液性癌组(158.6 pM, 51.3-232.5 pM)、子宫内膜样癌组(772.3 pM,608.2-934.9 pM)、透明细胞癌组(——)。浆液性癌组外周血清HE4水平明显高于粘液性癌组,Wilcoxon秩和检验统计量(z= -3.43,P=0.001<0.05)差异有统计学意义。子宫内膜样癌和透明细胞癌的患者样本量分别是4例和2例,由于样本量太少不再进行比较。3卵巢癌组不同分化等级间血清HE4水平比较:高分化Gl级组、中分化G2级组、低分化G3级组三组血清HE4的浓度分别为(58.7 pM, 31.3-210.3 pM)、(529.3 pM, 115.1-812.0 pM)、(609.2 pM,232.5-1080.9pM)。三组间比较采用K-W检定方法,χ~2=13.4,P=0.001<0.05,差异有统计学意义,分化越低,血清HE4含量越高。4卵巢癌组不同手术-病理分期血清HE4水平比较:依据卵巢恶性肿瘤临床手术病理分期FIGO2000进行分期。卵巢癌Ⅲ-Ⅳ期组血清HE4水平为(165.2 pM , 45.0-483.1 pM) ,显著高于Ⅰ-Ⅱ期组(626.6 pM ,231.7-1078.3pM),Wilcoxon秩和检验统计量(z=-2.93,P=0.003<0.05),差异有统计学意义。5卵巢癌术前和术后1周血清HE4比较:44例卵巢癌中的22例接受了理想肿瘤细胞减灭术的患者,术后1周血清HE4较术前降低,术前和术后一周血清HE4的浓度分别为(372.6 pM,124.2-812.5 pM)、(194.8 pM,36.3-500.2 pM),采用Wilcoxon符号秩检验(Wilcoxon signed-rank test)统计量(z=-3.98,P<0.001),差异有统计学意义。6良性上皮性卵巢肿瘤组不同病理类型间血清HE4水平比较:浆液性囊腺瘤与粘液性囊腺瘤的血清HE4的浓度分别为(39.9 pM,33.5-49.4 pM)、(47.8 pM,37.7-56.8 pM),采用Wilcoxon秩和检验统计量(z=-1.54,P=0.12>0.05),两组间的血清HE4水平分布无显著差异。7血清HE4水平对卵巢肿瘤的诊断价值:应用SPSS13.0统计软件ROC曲线进行分析,结果显示HE4诊断的正确度较高。以术后病理诊断作为诊断的金标准,44例卵巢癌组作为病例组,56例良性上皮性卵巢肿瘤和40例女性健康志愿者共96例作为对照组,绘制ROC曲线进行分析,ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.91,标准误为0.04,95%的近似置信参考区间为(0.83-0.98)。8以卵巢癌组作为病例组,良性上皮性卵巢肿瘤组和女性健康志愿者组作为对照组,得出血清HE4的诊断标准:当血清HE4浓度≥73.09 pM时诊断为阳性;当血清HE4浓度<73.09 pM时诊断为阴性。此时灵敏度(sensitivity)=86.4%,特异度(specificity)=l。9血清HE4与CA125对卵巢癌诊断的评价:以术后病理诊断作为金标准,44例卵巢癌作为病例组,56例良性上皮性卵巢肿瘤组为对照组。血清CA125≥35.0 u/ml诊断为阳性;<35.0 u/ml诊断为阴性。血清HE4浓度≥73.09 pM时诊断为阳性;血清HE4浓度<73.09 pM时诊断为阴性。绘制ROC曲线进行分析,血清HE4的ROC曲线下面积为0.92,标准误为0.04,CA125的ROC曲线AUC为0.98,标准误为0.01。HE4和CA125诊断正确率分别为95.7%、90.0%均较高。血清HE4检测特异度为1、阳性预测值为1、Youden指数为0.86,均较CA125高,检测的灵敏度为86.4%、阴性预测值为94.1%较CA125稍低。10对血清HE4与CA125联合检测的诊断效能进行分析,联合灵敏度为95.5%,联合特异度为89.6%,联合正确率为91.4%,与单独应用血清HE4或单独应用血清CA125相比较,二者联合后的诊断敏感性提高。结论:1应用ELISA双抗体夹心法测定卵巢癌患者血清中HE4水平明显高于良性上皮性卵巢肿瘤患者与女性健康志愿者,并且卵巢癌患者血清HE4水平与卵巢癌的临床病理类型、分期、分化程度有关。2血清HE4诊断卵巢癌的灵敏度及特异度比较高,在卵巢癌与良性上皮性卵巢肿瘤鉴别与诊断上的特异度优于CA125,临床诊断效能比较好。有望成为一种新的卵巢癌血清肿瘤标志物应用于临床检测,进一步提高卵巢癌的早期诊断率。3卵巢癌患者经理想肿瘤细胞减灭术治疗其术后血清HE4较术前明显降低。因此血清HE4可以作为监测卵巢癌治疗效果的一个有效指标。