ZFX基因在骨肉瘤细胞系中的表达及调控骨肉瘤恶性增殖的相关功能性研究

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骨肉瘤是一种常见的原发性骨肿瘤,多发生于青少年发育迅速的时期,其恶性程度很高,预后极差,术后五年的存活率低于20%。据报道,骨肉瘤如不及时治疗,往往会在6至12个月内通过血行转移的方式发生肺转移现象,从而导致患者死亡。伴随着近年来诊断技术的进步和化学治疗方法的迅速发展,骨肉瘤的治疗效果有了较大的改善。然而如何控制骨肉瘤的发生和复发转移,依然是目前骨肉瘤临床中亟待解决的难题。随着分子生物学技术的进展,基因操作成为常见的生物学实验手段。针对单个分子的操作能够进一步指明其在诊断和靶向性治疗方面的用途,受到研究人员关注。目前国内外研究学者利用RNAi抑制或下调在骨肉瘤发生、发展过程中起关键作用的癌基因、抑癌基因、凋亡相关基因等肿瘤相关基因的表达,从而为转化医学寻找更为合适的分子靶标。2011年ZFX基因作为癌基因促进喉癌恶性增殖的功能被首先报道,后续的研究表明,作为一个锌指蛋白转录因子,ZFX在前列腺癌、胃癌、胶质瘤、食管癌等肿瘤中同样表现出显著的促癌功能。但是,目前尚无ZFX在人骨肉瘤中的相关报道。我们通过前期研究发现ZFX表达在骨肉瘤组织中异常增高,继而应用RNAi技术介导骨肉瘤细胞株ZFX基因沉默,探讨封闭ZFX基因对骨肉瘤细胞生长的影响,探讨ZFX在骨肉瘤发生,发展中的作用。MTT生长曲线和体外克隆形成实验结果表明,ZFX沉默导致骨肉瘤Saso-2和MG63细胞的恶性增殖能力显著降低。为了进一步验证细胞增殖能力下降是否与细胞周期的改变有关,我们通过流式检测PI染色标记的细胞,发现ZFX沉默组的细胞周期明显被阻滞在G0/G1期,并引起sub-G1期的细胞显著增多。这些结果表明ZFX基因。ZFX能够调节细胞的增殖和周期。ZFX可能在骨肉瘤细胞的恶性增殖和抗凋亡机制中起重要作用,是骨肉瘤恶性增殖的一个关键性的调控因子。本研究首次报道了ZFX基因对细胞增殖的影响,为ZFX在多种肿瘤模型中的功能研究提供了思路和参考。有关ZFX影响细胞增殖的分子机制还有待进一步的工作证实。
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