PDO静电纺丝支架结合浓缩生长因子提取液对皮肤成纤维细胞胶原合成的影响

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背景:
  皮肤中胶原蛋白是维持年轻化的皮肤的基础物质,胶原蛋白的流失会造成皮肤的皱纹及老化。目前线雕是整形美容科常用的美容手段,但线雕的美容效果大约只能维持2年左右。线雕的常用材料是聚对二氧环己酮(Polydioxanone,PDO),PDO可以刺激体内Ⅰ型及Ⅲ胶原蛋白的合成,同时大量的研究证明血小板浓缩物(Concentrated growth factor,CGF)可以促进伤口的愈合,其中所含的生长转化因子-β1(Transforminggrowthfactor-beat1,TGF-β1)可以促进成纤维细胞分泌胶原蛋白。本研究将PDO与CGF提取液结合,制备出一种含有生长因子的PDO材料,即CGF-PDO(Concentrated growth factor- polydioxanone),体外研究CGF-PDO对皮肤成纤维细胞胶原合成的影响,为临床增强PDO在面部美容整形中的效果提供依据。
  目的:
  本研究的目的是制备一种含有生长因子的PDO新型材料。将PDO及CGF提取液结合,利用CGF提取液中大量的TGF-β1刺激成纤维细胞胶原合成,增强其在面部植入的整形效果并延长作用时间。
  材料与方法:
  采用静电纺丝技术将PDO制备成纳米级的生物可吸收支架,将CGF提取液通过冻干的方式加载到PDO支架上,制备CGF-PDO支架。通过扫描电子显微镜观察支架纤维的直径,同时检测材料的机械性能,生物相容性及细胞毒性,酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)评估CGF-PDO支架中TGF-β1的释放速率,实时荧光聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)、免疫荧光(Immunofluorescence,IF)评估胶原蛋白合成量。
  结果:
  扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy,SEM)观察测量CGF-PDO支架纤维直径达到纳米级;机械性能检测中显示CGF-PDO支架弹性模量与皮肤弹性模量相似;细胞活性检测(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测显示10%及30%CGF-PDO支架与对照组相比具有良好的生物相容性(P<0.001),细胞毒性小;ELISA检测到CGF-PDO支架中TGF-β1在前7天处于迅速释放的阶段,但第7天后支架可以稳定持续的释放TGF-β1;RT-PCR检测到在第7天时30%CGF-PDO组中TGF-β1、Col3a1及Col1a1的基因表达量明显高于对照组(P<0.001);IF染色显示到第7天时10%及30%CGF-PDO支架上成纤维细胞I型胶原及Ⅲ型胶原蛋白合成量明显高于其他各组。
  结论:
  合适浓度的CGF-PDO支架可以更好的促进细胞合成胶原蛋白。
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