基于转录水平研究植物激素在果梅季节性休眠中的作用

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangwang198
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
果梅(Prunus mume Sieb. et Zucc)源于中国,是一种重要的亚热带果树作物。季节性芽休眠是多年生植物适应外界的一种重要的生理机制。在木本植物中发现很多树种的休眠生物过程是由多基因调控的。大量研究表明植物激素在调控芽休眠过程中也起到了重要作用。为了进一步研究果梅季节性休眠机制,以国家果梅种质资源圃的果梅品种‘桃形梅’和‘丰后’为材料,首先利用数字基因谱测序(Digital gene expression,DGE),对休眠芽进行了差异基因的筛选,然后应用液相色谱-串联质谱法(Liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometric, LC-MS/MS)检测相应激素在不同休眠期的变化,并且利用荧光定量PCR (real-time quantitative RT-PCR, qRT-PCR)测关键基因的差异表达分析。主要研究结果如下:1.采用DGE技术在转录水平上分析了果梅季节性休眠相关基因的差异表达。结果表明,四个不同休眠时期的花芽分别测出了19690、16527、19560和20971个相关基因。内休眠与抑制性休眠时期对比分析,得到7192个差异表达基因;生态休眠与内休眠时期对比分析,得到6042个差异表达基因;休眠解除与生态休眠时期对比分析,得到5723个差异基因。基因功能分析表明,休眠差异表达基因主要与细胞质、细胞浆的代谢以及与膜结合的细胞器等的代谢相关。通路富集注释分析显示,在内质网与核糖体通路中涉及的休眠差异表达基因频率较高。测序结果中还发现了,生长素,脱落酸(ABA),乙烯和茉莉酸(JA),以及锌指蛋白相关的基因在不同休眠时期表达差异显著,在果梅季节性休眠中有着重要的调控作用。2.运用qRT-PCR分析了果梅休眠ABA相关基因在不同休眠时期的‘桃形梅’和‘丰后’中的表达水平,结果表明,ABA相关基因在休眠前期表达量较高,其中上述两个基因在‘丰后’芽中表达量显著高于‘桃形梅’芽中的表达量。同时,我们应用LC-MS/MS法检测了不同休眠时期‘桃形梅’和‘丰后’花芽中的ABA含量。结果表明,两品种花芽中的ABA均在休眠前期含量较高。说明植物内源激素ABA对果梅休眠可能起到关键的作用。3.利用qRT-PCR分析了果梅休眠GA20ox在不同休眠时期的‘桃形梅’和‘丰后’中的表达水平,结果表明,GA20ox在休眠后期表达量较高。同时,我们应用LC-MS/MS法检测了不同休眠时期‘桃形梅’和‘丰后’花芽中的赤霉素(GA)含量。试验结果显示:两品种花芽中的GA含量在生态休眠和休眠解除时期相对较高。同时,两品种叶芽中的GA含量在后期显著增高。暗示植物内源激素GA对果梅休眠的重要性,且GA20ox是重要的调控基因。4.建立了不同果梅品种花芽四个休眠时期的茉莉酸含量的LC-MS/MS测定方法。样品经过甲醇提取,Agela Cleanert SPE-N H2固相萃取小柱净化,C18反相柱进行色谱分离。以乙腈-水(水相含0.05%乙酸)为流动相,质谱分析采用ESI负离子源和二级串联质谱模式。结果显示:方法标准曲线线性良好,R2(JA)=0.9992,平均回收率范围为78.18%-97.49%,1.25%-8.27%(RSD,n=3)的相对标准偏差。该方法操作简便、灵敏度高、选择性好、回收率高,适合果梅花芽中JA的测定。结果表明,被测两个品种的果梅花芽中,休眠解除和生态休眠时期的JA含量高于内休眠和抑制性休眠时期的,说明内源激素JA可能有抑制果梅休眠和促进花芽正常生长的作用。
其他文献
一段时间以来,中国石化华东石油局液碳公司复工复产跑出加速度.5月8日,公司完成了工优一车间的二氧化碳冷凝装置除锈、清垢、节能降耗整改,为夏季安全生产和产品稳定供应提供
期刊
本研究以甜樱桃(Prunus.avium L.)品系6-7、6-3和三倍体杂种樱桃Gisela5(P.cerasus×P.canescens)为试材,首先通过对影响樱桃小茎尖培养的若干因素的研究,建立了樱桃茎尖培养的快繁
“一带一路”倡议给我国经济发展带来了机会,也对高校的人才培养提出了更多的要求,特别是在一定程度上加大了对英语人才的培养需求.就高职院校而言,应该注重培养学生的学习能
番茄属于喜温性蔬菜作物,最适宜温度范围为20~25℃,适应温度范围为15~33℃。但在生产中周围的环境温度往往会超过这一温度范围,达到35℃以上,甚至超过40℃。高温胁迫成为番茄生产中
以葡萄二倍体品种和四倍体品种为亲本,配制7个杂交组合,利用胚挽救技术进行培育三倍体葡萄新种质的研究。杂交组合分别为‘无核白×巨峰’、‘克瑞森×巨峰’、‘火焰无核×巨
非常时期rn随着企业全面复工复产,疫情防控工作进入到最为关键的阶段.珠江实业集团党委向全体干部员工发起了“抗疫情、抓生产、稳增长、促发展”的主题倡议,各条战线、各个
期刊
在频繁的跨国旅游交流中探究提升城市国际形象的可行性及实践路径,逐渐提升城市对全球和区域产生的国际影响力,成为了城市旅游及发展的重要议题.然而,同质化的旅游招牌导致扬