制备兔颈总动脉脱细胞基质的方法研究

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背景:心血管类疾病严重危害人类身体健康,血管重建在临床上具有十分重要的地位,寻找合适的血管移植物逐渐成为人们关注的重要课题。目前临床上用于血管支架的生物材料包括天然血管、脱细胞基质、人工替代物等。组织工程和再生医学迅猛发展,目前全生物化的异种血管移植已成为热点研究内容。已开发的材料在大中口径血管替代物方面取得较好的效果,但小口径血管(直径小于6mm)的通畅率较低,替代人小动脉的人工血管移植由于内膜增厚、易形成血栓等原因一直未获得满意的效果。临床上急需寻求不易形成血栓的小口径血管替代物。本实验采用多种去除细胞的方法组合,来制备兔颈总动脉脱细胞血管支架,并对不同方案制备的脱细胞支架进行评价,目的是希望得到制备兔颈总动脉脱细胞血管支架的优化方案。方法:联合采用物理处理法、化学处理法和酶学处理法去除细胞,制备兔颈总动脉脱细胞血管支架,应用组织染色、电子显微镜、细胞毒性评价以及皮下包埋等方法观察组织工程血管的管壁构建组织学、脱细胞支架的细胞毒性以及免疫原性。结果:我们组合出三种制备脱细胞血管支架的方案,均能够将兔颈总动脉脱细胞完全,无残存细胞及细胞残片,细胞外基质保存完好,血管支架三维结构保存完好,脱细胞前后的生物力学性能无明显改变,脱细胞的支架具有低细胞毒性和免疫原性。结论:本实验探寻的几种脱细胞方法所制备的组织工程血管能够比较完全地去除掉血管壁上的细胞,并且能够较完整地保存细胞外基质成分,为组织工程方法制备具有分层结构的组织工程血管的提供参考。
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