元胡止痛片由延胡索(醋制)、白芷两味中药组成,具有理气、活血、止痛的功效,用于气滞血瘀的胃痛、胁痛、头痛及痛经,收载于1985年及其以后各版《中国药典》中。延胡索中的生物碱类和白芷中的香豆素类成分具有较强的药理作用,为方中主要活性成分。目前多以一个或几个主要成分的含量对元胡止痛片进行质量控制研究,难以全面反映其质量。本论文采用指纹图谱、多成分定量分析等技术,较全面了解化学信息的基础上,结合肠吸收-体外活性联用方法进行离体血管活性实验研究,从不同角度综合评价了元胡止痛片的质量优劣,为制订科学合理的质量控制方法奠定了基础。主要研究结果如下：元胡止痛片指纹图谱研究建立了快速灵敏的UPLC/Q-TOF-MS分析方法用于15批次元胡止痛片的指纹图谱研究,明确了其中的18个共有成分。并对共有成分进行分析鉴定,根据质谱信息及相关文献鉴定了其中的15个成分,分别为原阿片碱、α-别隐品碱、黄连碱、延胡索乙素、四氢小檗碱、紫堇碱、巴马汀、小檗碱、白当归脑、脱氢紫堇碱、氧化前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素/8-甲氧基异欧前胡内酯、异欧前胡素、蛇床子素。通过成分鉴定明确了方中的整体化学信息,为定量分析成分的选择及质量评价提供重要参考。以共有成分为特征进行聚类分析,评价了样品间的变异性,所有样品共聚为两类,发现同一厂家的样品变异较小,基本能聚为一类。二、元胡止痛片多成分定量分析建立了RRLC-QQQ分析技术对元胡止痛片进行定量分析,17个成分在9min内完全分析完毕,分别为东莨菪内酯、原阿片碱、α-别隐品碱、延胡索乙素、黄连碱、四氢小檗碱、紫堇碱、小檗碱、白当归脑、白当归素、花椒毒素、佛手柑内酯、茴芹内酯、氧化前胡素、欧前胡素、蛇床子素、异欧前胡素。分析结果表明各成分含量有较大差异,原阿片碱、延胡索乙素、黄连碱、紫堇碱、白当归素、欧前胡素、异欧前胡素等为方中主要的高含量成分,其中指标性成分延胡索乙素含量最高,平均含量为313.06μg/g；东莨菪内酯和蛇床子素含量极低,不足1.00μg/g。延胡索乙素在不同样品中含量也有较大差异,在S15、S13、S12样品中含量最高(S表示样品),在S1-S6样品中含量较低。以17成分含量总和计,S12、S13、S14样品中含量最高,S7-S11样品中含量最低。以17个成分含量为特征进行聚类分析,发现其结果与指纹图谱聚类分析结果基本一致,也能体现样品的整体化学信息。所建立的方法简单、灵敏、可重复,可用于元胡止痛片的多成分定量研究及质量评价。三.肠外翻一离体血管联用方法的建立本文建立了肠外翻-离体血.管联用方法,首先通过肠外翻囊吸收实验,制备元胡止痛方提取物的含药肠吸收液,将其作为离体血管实验的样品,应用于元胡止痛方提取物的血管活性评价。实验结果发现,所建立的联用方法精密性、重复性、灵敏性较好,可用于实验研究。元胡止痛方提取物的含药肠吸收液具有较好的舒张血管效应,随浓度/剂量的增高而效应增强,高(生药0.16g/mL)、中(生药0.08g/mL)、低(生药0.04g/mL)浓度最终分别达到81.53±3.98%、66.85±10.01%和43.64±17.83%的血管舒张率,呈量效及浓度依赖关系,空白肠吸收液没有表现出血管活性。与常规体外药理实验相比,本文所建立的联用方法排除了不被吸收成分及成分生物利用度的影响,更能合理地反映样品的真实生物活性。四、元胡止痛片肠吸收成分分析基于经建立的RRLC-QQQ分析方法,对肠吸收实验前后方中17个化学成分含量进行测定。结果发现,17个成分均能通过肠囊被吸收,且.提取物中各成分肠吸收量在高浓度下最高,低浓度最低,呈浓度依赖性。提取物中的7个高含量成分是紫堇碱、黄连碱、欧前胡素、原阿片碱、异欧前胡素、a-别隐品碱和延胡索乙素；而经过肠吸收过程后,肠吸收液中的高含量成分分别为原阿片碱、紫堇碱、a-别隐品碱、延胡索乙素、黄连碱、白当归素和欧前胡素。以此看出,与提取物相比,肠吸收液中的成分含量有较大变化。不同成分肠吸收率亦有较大差别,以白当归脑(87%)和白当归素(85%)等吸收率较高；而欧前胡素、蛇床子素、欧前胡素等吸收率较低,不足0.5%。实验结果显示了各成分吸收率的差异性,同时也证明了含药肠吸收液作为体外药理实验的科学合理性。五、基于肠外翻-离体血管联用方法的元胡止痛片血管活性评价运用已建立的肠外翻-离体血管联用方法对其中9批次元胡止痛片进行了血管活性评价。结果发现不同批次元胡止痛片肠吸收液均能产生舒张血管活性,且随剂量的增加而活性增强,在最终累积剂量1600μL时舒张率最高。其中S13舒张率高达80%；而S7、S9、S11舒张率不足10%。由此可见,批次间样品舒张血管活性差异较大,且由血管活性强弱可直观评价其在此方面的质量优劣。能直观地看出样品在血管活性方面的质量优劣,解决了化学评价不能直接反映其内在质量优劣的缺陷,活性评价为元胡止痛片的质量评价提供一个更为客观真实的结果。本研究基于指纹图谱技术、多成分定量分析及血管活性对元胡止痛片进行了综合研究。指纹图谱分析能从整体上表征化学信息,有效地进行真伪品的鉴别,通过色谱相似度信息评价样品的一致性与稳定性；多成分定量分析通过比较主要成分含量高低,为质量评价提供重要参考；活性评价通过对血管舒张的效应能直观的评价元胡止痛片在血管活性方面的质量优劣。通过多种技术手段对其化学定性信息、样品成分含量及血管活性的研究,有效地进行了元胡止痛片的综合评价,多角度的评价模式也为中药质量控制研究提供重要参考。