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动脉粥样硬化（As）是一个慢性病理过程，最近研究表明它的发展阶段始自胎儿期，一直延续到生命的终结，在这长达几十年的漫长发展过程中，多种因素参与了As的发生。正因如此，对于As的防治就需要常年、针对众多发病环节进行预防，寻找毒副作用少、价格便宜以及作用相对广泛的药物也就显得尤为重要。已知血小板活化因子（PAF）和细胞内游离钙离子水平与As的发生关系密切，而PAF受体拮抗剂银杏内酯B（GB）和钙离子内流阻断剂前胡丙素（pra-C）的原材料银杏叶与白花前胡的来源丰富，为了探索二者对As防治的药用价值，研究了GB和pra-C对牛主动脉平滑肌细胞（SMC）增殖和泡沫细胞形成的影响，并探讨了可能机制。 以3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入试验确定细胞的增殖程度，应用流式细胞术测定细胞周期，用MTT法和LDH活性测定观察药物对细胞代谢的影响。结果可见,GB、银杏内酯A和B的混合物（GA:GB）在10-9mol·L-1～10-5浓度下，可呈浓度依赖性地抑制血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导的SMC增殖，其中GB和GA:GB对细胞DNA合成量的最大抑制率分别为54.6％和69.4％，相同浓度条件下，二者作用没有明显差别，10-7mol·L-1的GB和GA:GB可分别将AngⅡ诱导增殖的SMC的细胞增殖指数由45.0％降至40.5 南京医科大学博士学位论文％和41．9％。GB和GA：GB尚可呈浓度依赖性地抑制血清单独诱导的SMC’H1dR的掺入量，降低处于有丝分裂期侣期)细胞的比例，明显抑制细胞线粒体中琉拍酸脱氢酶活性，但细胞培养上清中的乳酸脱氢酶活性则不受影响。提示，GB可以有效地抑制动脉壁SMC的增殖，其机制主要与阻止细胞进入有丝分裂期p期)有关，而与细胞毒性无关，GB的作用除了桔抗PAF受体活性外尚可能有其他机制发挥作用。Pra－l二对血清以及血清和Aug 11共同诱导的SMC增殖均呈剂量依赖性地抑札其中，对SMC’H1dR掺入量的抑制最大抑制率分别为的刁％和59刀％，同时，pr个C可明显减少两种诱导 SMC增殖模型中 S期细胞所占的比例，但不改变细胞培养上清中的LDH活力，提示通过阻止钙离子的内流，pra－C能够阻止细胞进入S期从而抑制SMC的增殖。作为阳性对照，观察了血管紧张素转换酶抑制剂体CEI)enalaprilatona购作用，结果可见ha对 Aug 11诱导 SMC增殖的抑制作用强于 GB和Wa(，其最大抑制率为 74．9％，但是，应用 Ena后，SMC培养上清中 LDH活力有升高的趋势，提示尽管GB和pra（对抗血管SMC增殖的能力不如 Ena，但是，就安全性而言，GB和 pra（可能更有应用前景。 用 50 u g·ml”‘重度修饰氧化性下密度脂蛋白（。x－LDL）与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育48小时后，细胞内总胆固醇厂q含量即增加一倍，表明泡沫细胞模型可靠。10”儿10”’mol·L”的 GB可呈浓度依赖性地抑制细胞内TC和胆固醇酯KE）含量的增多，而对CE占TC的比值基本没有影响，提示GB可阻止细胞内胆固醇的积聚，延缓泡沫细胞的形成，但对乙酞辅酶A胆固醇酞基转移酶（ACAT的活性无影响。 2 南京医科大学博士学位论文 GB可呈剂量依赖性地抑制 MPM对重度、中度和轻度修饰的‘HslOX工DL的摄取。利用非特异吞噬抑制剂细胞松弛素Dkyt小chalasin D）处理细胞，可见MPM对三种不同程度修饰 ox工DL的摄取能力均明显降低，6 GB的应用则导致 MPM对 OX工DL的摄取量更低，提示 GB的作用可能是通过阻止细胞的受体途径。抗 CD3 6和抗CD68的抗体不能阻止MPM摄取重度OX工DL的能力，表明其不参与重度狐士DL的识别。30倍于”勺0DLDL量的多聚次黄噪吟OOly I）—一种SR－A特异性＠己基，只能部分阻断OX工DL的摄取，提示除了 SR－A以外，尚可能有其他类型的膜受体参与重度OX工DL的清除。与 MPM摄取重度 OX丁DL的特性不同，MPM摄取中度和轻度修饰‘乃IOX士DL的能力均可被p＊y、抗CD36或抗＊＊68的抗体抑札提示中度和轻度修饰的狐工＊L不仅可被＊＊A识别，亦可经＊＊36和＊＊68进入胞 内。＊B不能改变抗＊＊36抗体和抗CD68抗体抑制MPM摄取中度和轻度OX工DL的能力，提示 GB的作用靶点可能在 CD36和 CD68；然而 GB对 polyl抑制NpM摄取重度、中度修饰 OX工DL能力的促进作用，提示 GB的作用靶点尚可能有其他膜蛋白。为进一步GB的作用是否与SRA有关，利用 RT－PCR法观察了 GB对 SR－A IRNA水平的影响，结果见 GB可有效降低 SR－A的表达水平，提示 GB亦可通过阻止职－A的摄取而发挥作用。 Pra(也能有效地抑制毗工DL的摄取，不仅可以降低细胞内胆固醇和胆固醇酯的积聚，而且能降低 MPM对重度修饰“SI似－LDL的总摄取量，但对其降解能力无影响对轻度和中度修饰’‘’1．ox工DL的清除也无作用，提示pra(不能作用于非特异吞噬及 3