成纤维细胞生长因子14为FGF家族成员之一,主要表达于中枢神经,其基因突变与神经系统异常疾病紧密相关,但目前关于FGF14与相关疾病及其作用机制方面的研究尚处于起始阶段。因此,本研究通过基因工程技术克隆FGF14基因片段、构建工程菌株及在大肠杆菌中的表达、纯化工艺研究,并研究FGF14蛋白对NIH3T3、PC12细胞促增殖活性及对Aβ_25-35诱导PC12细胞建立阿尔兹海默症模型的神经保护作用。本课题的研究结果如下:FGF14基因片段与pET15b表达载体连接形成重组质粒,转化到感受态BL21（DE3）中,将重组FGF14蛋白在大肠杆菌表达体系中高密度表达。通过超声破碎方法破碎菌体使目的蛋白释放,经SDS-PAGE方法验证得出FGF14蛋白大部分以包涵体形式表达。通过包涵体清洗、盐酸胍变性,采用稀释复性方法使蛋白恢复其正常的空间结构,再通过表达载体具有组氨酸标签与镍柱特异性亲和特性进行纯化获得较高纯度FGF14蛋白。表达纯化工程化技术的建立为FGF14蛋白应用和机制研究提供了保障。选择NIH3T3、PC12细胞利用CCK8的方法检测FGF14蛋白促增殖生物学活性。经检测发现在无肝素存在条件下FGF14蛋白对NIH3T3、PC12细胞促增殖活性不明显或无促增殖活性,而FGF14在与一定浓度肝素结合的条件下在PC12细胞中具有了明显的促增殖活性。活性检测方法的建立为FGF14蛋白的定性和定量提供了重要依据。利用Aβ_25-35损伤PC12细胞研究FGF14蛋白对神经保护作用。采用Aβ_25-35损伤浓度为40μmol/L、作用时间为48 h,成功构建神经损伤模型;通过剂量摸索发现FGF14蛋白在4¹6 ng/mL浓度范围内,减轻Aβ_25-35导致的神经损伤呈现出剂量依赖性,同时在该浓度范围内能够显著抑制LDH、MDA的释放,证明FGF14蛋白对PC12细胞具有神经保护作用。利用荧光以及流式的技术方法同样证明FGF14蛋白具有较好的神经保护作用。进一步,利用Western Blot技术证明FGF14蛋白是通过MAPK信号通路发挥神经保护作用。