三氯乙烯（Trichloroethylene,TCE）是一种工业上使用广泛的清洗剂、溶剂,在电镀、印染等工业工艺中有重要作用。TCE在生产、生活过程中的不当存放和排放可导致急性爆炸事故及多种健康危害。TCE进入机体后,主要在肝脏内进行代谢,其原型及代谢物毒作用的靶器官包括肝、肾、脑和心脏等。已有研究表明三氯乙烯具有免疫毒性,可引起药疹样皮炎等超敏反应的发生。同时,它还具有一定的遗传毒性、致畸、致癌作用,已先后被EPA和IARC确定为人类致癌物。后续研究表明,接近环境暴露水平的三氯乙烯即可引起免疫毒性作用,导致免疫性肝炎的产生,但其免疫毒性机制尚未阐明。为探索TCE引起自身免疫性肝炎所涉及的毒性通路和关键蛋白,本课题主要从以下三个方面具体展开:1.TCE长期低剂量暴露诱导小鼠自身免疫性肝炎动物模型的建立及鉴定方法:实验共设置三组,TCE浓度分别为0、0.05及500mg/L。MRL+/+小鼠亲代合笼时即进行饮水暴露,F1代出生21天后直接经口自由饮水暴露。为减少TCE在水中降解产生的影响,每周更换三次小鼠饮用水并记录动物饮水量。根据参考文献,染毒100天后开始以每间隔4周的方式取材进行病理鉴定和自身抗体、生化等相关指标的检测。结果:染毒172天后,小鼠血浆中抗可溶性肝抗原抗体（SLA）、免疫球蛋白（IgG）（均为免疫性肝炎重要诊断指标）在染毒组中升高,与对照组的差异具有统计学意义（P<0.05）。同时,染毒组肝脏病理检查出现明显淋巴细胞浸润灶。自身抗体变化后约两周,与对照组相比,染毒组血浆中生化指标白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、游离胆红素（IBIL）升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:本研究成功建立了 TCE长期低剂量暴露诱导MRL+/+小鼠自身免疫性肝炎模型。2.TCE致MRL+/+小鼠自身免疫性肝炎的自身抗原筛选方法:以各组小鼠血浆和肝脏来源的蛋白分别作为抗体和抗原,利用双向电泳串联质谱技术,鉴定在不同处理组血浆中抗体水平发生变化的蛋白。结果:共鉴定142个蛋白,8个蛋白与自身免疫性疾病或免疫反应有关,经验证烯醇化酶抗体在TCE染毒组中升高,三条肽段可能存在二氯乙烯巯基化修饰。结论:烯醇化酶可能是TCE致AIH的抗原且二氯乙烯巯基化修饰可能与该过程有关,有待进一步验证。3.TCE致MRL+/+小鼠自身免疫性肝炎的蛋白质组学研究方法:分别提取各组小鼠肝脏组织的蛋白,利用定量蛋白质组学技术筛选差异表达蛋白并进行验证。结果:共鉴定4919个蛋白,蛋白质相互作用分析发现,与S-腺苷-蛋氨酸（S-adenosyl-L-methionine）代谢相关的蛋白Elp3表达升高、Smyd5和Comt表达降低。结论:S-腺苷蛋氨酸代谢可能在TCE诱导自身免疫性肝炎过程中发挥重要作用。