华山松大小蠹(Dendroctonus armandi Tsai et Li),主要分布于我国秦岭巴山林区,是危害华山松(Pinus armandi Franch)的主要蛀干害虫,其主要选择危害树龄30年以上的健康华山松,给秦岭巴山林区的生态系统带来巨大损失,严重地影响了该区域的生态环境健康和林业可持续发展。研究表明西部松小蠹诱剂(exo-brevicomin)在大小蠹信息素合成中起重要作用,并受保幼激素及喂食诱导调节。因此,研究大小蠹exo-brevicomin路径相关基因在不同时期、不同组织和不同处理条件的表达水平,对揭示大小蠹信息素的合成具有具有十分重要的价值和意义。应用RACE和qRT-PCR等分子生物学技术,研究华山松大小蠹(Z)-6-壬烯-2-醇脱氢酶(ZnoDH)和CYP6CR1基因在不同时期、组织和不同处理下的表达,取得以下研究结果:1.通过同源克隆,获得华山松大小蠹exo-brevicomin路径CYP6CR1基因序列全长,为1769 bp,经氨基酸序列相似度比较分析,确定为P450家族基因;获得华山松大小蠹exo-brevicomin路径ZnoDH基因序列片段,确定为SDR家族基因,片段长度为566 bp。2.华山松大小蠹CYP6CR1基因分子质量为146.93 kDa,编码507个氨基酸,等电点为5.00。3.华山松大小蠹CYP6CR1和ZnoDH基因在不同发育期表达差异显著(p<0.01),其中蛹期表达量最高,完全羽化成虫期和入侵成虫期表达差异显著。4.华山松大小蠹CYP6CR1和ZnoDH基因在不同组织和雌雄成虫间的表达量差异显著(p<0.01),雌雄成虫在后肠表达量最高;雌性成虫CYP6CR1在脂肪体中的表达量高于雄性成虫,而ZnoDH则在雌性成虫前中肠的表达量高于雄性成虫;CYP6CR1和ZnoDH在其余各组织中的表达量均为雄性成虫高于雌性成虫。5.华山松大小蠹CYP6CR1和ZnoDH基因在不同时间保幼激素处理条件下差异显著(p<0.05),2个基因的表达量随保幼激素处理时间的延长而增加,到达最大表达量后逐渐降低,36 h时CYP6CR1基因在雄性成虫中的表达量高于雌性成虫,而在其它时间雄性成虫的表达量低于雌性成虫。6.华山松大小蠹CYP6CR1和ZnoDH基因表达量随喂食时间的延长而降低,到达最低表达量后逐渐回升;华山松大小蠹雄性成虫CYP6CR1和ZnoDH基因在不同喂食时间表达量差异显著(p<0.05),雄性成虫在不同时间的表达量均高于雌性成虫。