邯邢铁矿链霉菌的分离方法与系统分类研究

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选用M5、M5’、水琼脂3种培养基,结合自行设计的铁矿浸汁培养基,以重铬酸钾做为细菌抑制剂,以0.125%的甜菜碱或丙酮酸钠的为生产促进剂,对邯邢矿区铁矿典型样品链霉菌分离情况进行了比较研究。结果表明:不同样品在不同培养基中分离获得的菌落数量与种类不同,铁矿浸汁培养基对各类样品的分离效果均最佳,添加甜菜碱或丙酮酸钠可以提高分离效率,重铬酸钾不能抑制细菌生长。   采用基于16SrDNA序列的系统发育分析、形态学、生理生化特性研究、细胞化学组分分析以及数值分类等分类技术,对分离和纯化得到的43株典型菌株进行分类,结果表明供试菌株均属链霉菌属(Streptomyces),分别与19个已知链霉菌系统发育关系最近。除163001、163005等10株菌与已知菌序列相同外,其余33株16SrDNA 序列与已知种存在差异,最高序列相似性在98.31%~99.92%间。其中菌株195004、195001与刺疣链霉菌(Streptomyces spinoverrucosus)同源性为99.47%、99.39%,菌株034005 与红灰链霉菌(Streptomyces rubrogriseus)同源性为99.09%,菌株195005 与小链霉菌(Streptomyces parvus)同源性为99.77%,菌株195011 与细黄链霉菌(Streptomycesmicroflavus)同源性为99.92%,菌株035035 与浅灰白链霉菌(Streptomyces griseoloalbus)同源性为98.70%,菌株035005 与脆弱链霉菌(Streptomyces fragilis)同源性为98.39%,菌株032004、032007与弗氏链霉菌(Str等3种培养基上的培养特征,采用平皿插片法进行菌体形态特征的观察,并进行了碳源利用、酶类产生和NaCl耐受性等实验和细胞壁化学组分分析。结果表明,所有供试菌株的细胞壁含L,L-DAP,均不含meso-DAP。   全部供试菌株均不含特征性糖(糖型C),细胞壁化学组分属于Ⅰ型。各菌株表型特征均与其系统发育归属相一致。数值分类分析结果表明,除菌株032004、195008、195009未聚群以外,其余40株供试菌株在91%的相似性水平上可以划分为13个表观群,与系统发育分析结果相比较,二者存在10类完全相同的类群,一致性较高。
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