本文分两部分论述了SDF-1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞部分生物学活性的影响。 第一部分：大鼠骨髓源CD133+/VEGFR-2+/CD34+EPCs的分离、纯化与鉴定 目的：本研究采用一种杂交瘤皿，根据内皮祖细胞集落形成单位（endothelial progenitor cells colony-forming units，EPCs-CFUs）的形态特征和EPCs表面特异性标记物分离EPCs。 方法：取大鼠股骨、胫骨骨髓，将全骨髓接种在聚苯乙烯材料的杂交瘤皿上，培养4-7天后出现干细胞集落单位（stem cells colony-forming units），在显微镜下将这些集落分别挑选出来后，取单个集落的一部分细胞，免疫荧光鉴定EPCs表面特异性标记物CD133/VEGFR-2。CD133/VEGFR-2双阳性即为EPCs-CFU。另一部分继续传代增殖，流式细胞术鉴定CD133/VEGFR-2/CD34。并把此方法定义为微孔法。 结果：全骨髓接种后第4天，显微镜下可见明显的CFUs。免疫荧光鉴定7.33±2.51％(n=5) 的CFUs为CD133+/VEGFR-2+ EPCs-CFUs，进一步传代培养，流式细胞术鉴定CD133/VEGFR-2双阳性率为73.28±7.43％, CD34/CD133双阳性率为70.36±10.17％ (n=3)。传代细胞可在体外形成血管样结构，并分化出内皮细胞特异性标记物vWF。 结论：通过微孔法成功地从大鼠骨髓分离到内皮祖细胞。 第二部分：SDF-1α对CD133+/VEGFR-2+/CD34+ EPCs增殖、迁移、黏附、血管样结构形成及凋亡的影响。 目的：观察基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α，SDF-1α)对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、黏附、细胞集落单位生长及血管样结构形成等生物学活性的影响，并初步探讨其作用机制。 方法：微孔法从大鼠骨髓提取CD133+/VEGFR-2+/CD34+ EPCs。不同浓度SDF-1α处理EPCs后，采用MTT、transwell迁移系统、黏附实验、细胞克隆实验等检测EPCs细胞增殖、迁移、黏附、细胞克隆生长以及血管样结构形成；采用氧化低密度脂蛋白诱导EPCs凋亡，Hoechst 33258染色和流式细胞术检测SDF-1α对EPCs凋亡率的影响。RT-PCR和Western blot检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平。 结果： SDF-1α浓度依赖性促进EPCs增殖、迁移和黏附、显著增强EPCs克隆形成和血管样结构形成，对照组与SDF-α各处理组比较差异均具显著性（n=3，P＜0.05或P＜0.01）。SDF-1α显著降低EPCs凋亡率，使凋亡率由Ox-LDL处理组的22.1±1.80％下降到Ox-LDL与SDF-1α共处理组的13.37±1.464％（n=3，P＜0.01）。SDF-1α浓度依赖性上调CXCR4 mRNA和蛋白表达，其中100μg/L SDF-1α处理组CXCR4蛋白表达量与对照组比较上调2.6倍。 结论： SDF-1α促大鼠骨髓源EPCs增殖、迁移、黏附、克隆生长及血管样结构形成，SDF-1α抑制Ox-LDL致EPCs凋亡。其生物学活性改善可能与上调CXCR4表达有关。