【摘 要】
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目的观察金雀异黄素联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞生物学行为的影响,证实金雀异黄素与顺铂具有协同作用,可促进卵巢癌细胞的凋亡并抑制其增殖及迁移。方法培养卵巢癌SKOV3细胞,分别给予金雀异黄素(0、20、40、80、160、200μmol/L)、顺铂(0、1、2、4、8、16μg/m L)单独作用24h、48h、72h,采用偶氮唑蓝(MTT)法对细胞增殖情况进行检测,筛选出合适作用浓度和作用时间;卵
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目的观察金雀异黄素联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞生物学行为的影响,证实金雀异黄素与顺铂具有协同作用,可促进卵巢癌细胞的凋亡并抑制其增殖及迁移。方法培养卵巢癌SKOV3细胞,分别给予金雀异黄素(0、20、40、80、160、200μmol/L)、顺铂(0、1、2、4、8、16μg/m L)单独作用24h、48h、72h,采用偶氮唑蓝(MTT)法对细胞增殖情况进行检测,筛选出合适作用浓度和作用时间;卵巢癌SKOV3细胞分为4组:空白组(含正常生长的SKOV3细胞并加入等量培养液)和实验组(金雀异黄素组、顺铂组、金雀异黄素联合顺铂组),药物作用48h后,细胞划痕实验检测金雀异黄素与顺铂单独及联合用药对SKOV3细胞迁移能力的影响;Hoechst33342染色法检测各组药物对卵巢癌SKOV3细胞核形态的影响;流式双标法(Annexin V-FITC/PI)检测细胞凋亡情况;免疫印记法(Western blot)检测PI3K、AKT、p-AKT、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果MTT检测法结果显示,随着金雀异黄素、顺铂浓度的增加,作用时间的延长,细胞增殖抑制率上升(P<0.05);选定金雀异黄素160μmol/L、顺铂4μg/m L进行用药,细胞划痕实验、Hoechst33342染色法、流式细胞术结果均证明,与空白组比较,金雀异黄素、顺铂单独及联合用药均可降低SKOV3细胞迁移能力,促进细胞凋亡(P<0.05),且联合用药结果显著高于单独用药(P<0.05);Western blot检测结果表明,与空白组比较,单独组及联合用药组SKOV3细胞p-AKT、PI3K及Bcl-2蛋白表达下调,Bax、Caspase-3蛋白表达上调,p-AKT/总AKT蛋白比值下降,且联合用药比单独用药结果更显著(P<0.05)。结论金雀异黄素对卵巢癌SKOV3细胞增殖在一定范围内具有抑制作用,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性;金雀异黄素可协同顺铂促进对卵巢癌细胞的凋亡作用。
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