荞麦属于蓼科荞麦属,是典型的“药食同源”杂粮作物。荞麦生长周期短,耐瘠薄,营养价值高,但其遗传资源及种质创新的研究较少。因此,利用遗传转化基础,打破荞麦杂交困难、种质创新难的瓶颈,提升荞麦研究水平成为研究重点之一。本实验通过正交试验,以甜荞(PI647061)和苦荞(ZNQ152)下胚轴为试验材料,采用不同植物激素(2,4-D、6-BA)对愈伤组织进行诱导,并设置不同浓度NAA诱导其进行再分化,形成再生植株。以此研究为基础,对5个甜荞和5个苦荞品种进行了出苗率、出愈率、再生率统计,筛选得到了2个高频再生荞麦品种,建立离体再生体系,获得的愈伤组织经农杆菌介导侵染后,进行GUS染色鉴定,筛选得到了阳性转基因材料。本试验为荞麦遗传转化体系构建和基因功能验证提供了理论及实践基础。本研究得出以下结论:(1)试验材料为荞麦无菌苗的下胚轴,设计不同浓度的培养基,正交试验为3因素(品种,2,4-D,6-BA)3水平,结果表明随着2,4-D浓度的增加,下胚轴愈伤组织生长速度较快,膨大明显,筛选得到愈伤组织诱导最佳培养基:MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L,此时愈伤组织颜色呈嫩绿色,结构疏松,外周均见球状突起,诱导率最高可达94.5%。(2)诱导下胚轴的愈伤组织进行再分化,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中不定芽分化数量最多,长势最好,分化率为63.1%。(3)使用带有pBI121载体的农杆菌菌株EHA105侵染愈伤组织,共培养两天,利用GUS染色技术鉴定阳性材料,为荞麦基因功能验证奠定了基础。