应用ECMO联合超滤复苏严重失血性休克兔减轻肾脏损伤的研究

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研究背景和目的:严重的失血性休克是创伤后死亡的主要原因,对严重失血性休克的救治一直是外科发展的难题。习惯上,在早期进行液体复苏可以快速恢复血压和组织灌注,但是早期大量快速补液可以稀释血液中的凝血因子,降低血液粘稠度,使血凝块移位而增加出血及血栓栓塞的发生,并且对急性肾功能不全的治疗效果一直不理想。体外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)因其强大的心肺替代功能,使许多危重症的抢救成功率明显上升。特别是心肺功能严重受损的患者,应用ECMO可以使心肺得到充分的休息,为后续的治疗争取时间。联合超滤技术可以很好的浓缩血液,排除血液中的氧自由基、炎症介质和多余的水分,提高血浆胶体渗透压,减轻组织间隙水肿,恢复体液平衡,减少因血流动力学的波动引起的并发症。本实验用新西兰大白兔建立压力控制型严重失血性休克的模型,分别利用ECMO联合超滤和液体对实验兔休克模型进行复苏,对比复苏效果,并观察和探讨ECMO联合超滤技术在减轻试验兔肾脏损伤中的作用。研究方法:(1)选用新西兰大白兔作为实验动物,建立压力控制型失血性休克的模型,观察和对比不同复苏方案的复苏效果。新西兰大白兔24只(n=24),按不同的复苏方案分为三组:1)休克未复苏组,8只(n1=8),不进行任何复苏;2) ECMO联合超滤技术复苏组,8只(n2=8),应用ECMO联合超滤对失血性休克模型进行复苏;3)液体复苏组,8只(n3=8),用自体血和乳酸林格氏液进行复苏。(2)在复苏后观察并记录各组实验兔的平均动脉压。分别于休克前、休克后及复苏后采集血液标本,检测此三个时间点的血液标本中乳酸(Lactic acid)、血肌酐(SCr)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,记录数据后通过单因素方差分析进行比较。(3)每组实验兔在复苏后观察2小时,然后处死实验兔采集肾脏组织标本。用肾脏组织标本制作石蜡切片,然后做以下处理:1) HE染色,观察各组实验兔肾脏组织病理学改变的差异;2)免疫组织化学染色,用免疫组织化学法检测各组实验兔肾脏组织中热休克蛋白-70(heat shock protein70)的表达程度,并对此蛋白的表达进行定量分析,比较其在各组实验兔肾脏组织中表达的强弱。实验结果:(1)三个组复苏后的平均动脉压比较,液体复苏组明显高于未复苏组(P<0.05),ECMO联合超滤复苏组明显高于液体复苏组和未复苏组(P<0.05);(2)血肌酐的水平,休克后较休克前明显升高(P<0.05)。复苏后,液体复苏组较休克未复苏组明显降低(P<0.05),ECMO联合超滤技术复苏组较液体复苏组明显降低(P<0.05),提示ECMO联合超滤技术复苏与液体复苏相比,对减轻肾功能的下降有明显作用。IL-6、TNF-α和乳酸的水平与血肌酐的水平有相同的趋势,提示ECMO联合超滤复苏与液体复苏相比,可以使组织得到更好的灌注,可以更有效的去除血液中的炎症因子,降低炎症反应的发生率,从而减轻炎症反应对肾脏组织造成的损伤;(3) HE染色,ECMO联合超滤技术复苏组肾脏组织损伤程度及炎症因子浸润程度较液体复苏组和未复苏组明显减轻,提示ECMO联合超滤复苏和液体复苏相比,可以更有效的减轻肾脏组织的损伤,液体复苏组肾脏组织损伤程度和未复苏组相似,提示液体复苏对减轻肾脏损伤作用不明显;(4)热休克蛋白-70在ECMO联合超滤技术复苏组的肾脏组织中的表达要明显低于传统液体复苏组和未复苏组,提示ECMO联合超滤复苏与液体复苏相比,可以明显的减轻肾脏组织在急性应激反应中的损伤。结论:在兔严重失血性休克的模型上,ECMO联合超滤技术的复苏效果优于传统的液体复苏,可以明显减轻肾脏组织的损伤。ECMO使组织器官得到良好的灌注,结合联合超滤可以很显著的降低血液中的炎症因子和氧自由基,从而减轻了炎症反应和氧自由基对肾脏组织的损伤。
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