论文部分内容阅读
目的研究小鼠感染日本血吸虫经吡喹酮杀虫治疗后，给予山奈酚治疗对肝组织虫卵肉芽肿和纤维化的影响。方法以日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠作为肝纤维化动物模型，将40只健康BALB/c小鼠随机分为6组：①A组：正常对照组（8只）；②B组：吡喹酮组（8只）；③C组：低剂量山奈酚组（5mg/kg，6只）；④D组：中剂量山奈酚组（10mg/kg，6只）；⑤E组：高剂量山奈酚组（15mg/kg，6只）；⑥F组：最高剂量山奈酚组（20mg/kg，6只），除正常组外，其余5组小鼠感染日本血吸虫后6W给予吡喹酮（500mg/(kg·d)×2d）灌胃治疗，每日1次。除正常对照组和吡喹酮组外，低剂量、中剂量、高剂量和最高剂量山奈酚组小鼠分别给予山奈酚5mg/(kg·d)×4W），10mg/(kg·d)×4W），15mg/(kg·d)×4W），20mg/(kg·d)×4W）灌胃治疗，每天1次。正常对照组和吡喹酮组给予等体积生理盐水灌胃治疗4W，每日1次。于用药4W后颈椎脱臼促死小鼠取肝脏。苏木精-伊红（HE)和Masson胶原纤维染色法观察肝脏虫卵肉芽肿面积和评价肝纤维化程度；免疫组化染色观察TGF-β1,Smad2/3,Smad7,TIMP1，α-SMA，COLⅠ，COLⅢ蛋白的表达情况；采用实时荧光定量PCR检测Smad2,Smad3,Smad7,α-SMA，TIMP1，COLⅢmRNA的表达情况。结果：山奈酚4个剂量组较吡喹酮组小鼠肝脏虫卵肉芽肿大小、纤维化评分、肝组织Smad2,Smad3mRNA及蛋白表达明显减轻，肝组织Smad7mRNA及蛋白表达增加，山奈酚4个剂量组随浓度梯度增高小鼠肝脏虫卵肉芽肿大小、纤维化评分减轻，肝组织内Smad2,Smad3mRNA及蛋白表达明显减轻，肝组织Smad7mRNA及蛋白表达水平依次递增，均具有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较，吡喹酮组，低剂量山奈酚组，中剂量山奈酚组，高剂量山奈酚组，最高剂量山奈酚组α-SMA，TIMP1,COLⅢ蛋白和mRNA的表达增高。与吡喹酮组相比，山奈酚各剂量组α-SMA，TIMP1，COLⅠ，COLⅢ蛋白和mRNA的表达降低（P<0.05）。山奈酚四个剂量组随给药浓度加大，α-SMA，TIMP1，COLⅠ,COⅢ蛋白表达量下降(P<0.05)，α-SMA，TIMP1,COLⅢmRNA的表达下降（P<0.05)。结论：山奈酚能明显减轻吡喹酮杀虫治疗后血吸虫虫卵肉芽肿所致肝纤维化，其作用机制可能通过干预TGF-β1/Smads的信路，抑制纤维化细胞因子α-SMA，TIMP1，COLⅠ,COⅢ的表达，发挥抗血吸虫肝纤维化的机制。