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兔波氏杆菌病是由支气管败血渡氏杆菌(Bordetella bronchiseptica, Bb),也称兔支气管鲍特杆菌或博德特氏杆菌,是一种能广泛的寄生在家畜、野生动物及实验动物呼吸道上皮细胞纤毛上的革兰氏阴性需氧小杆菌,能引起兔、猪、马、狗、鼠等多种哺乳动物的呼吸道疾病,感染动物主要以鼻炎和支气管肺炎为特征。近年来,也有该菌感染人引起发病的报道,尤其是年幼的儿童和抵抗力较差的老年人。在我国,该茵在兔群中的感染率比较高,无论是幼兔、青年兔、种兔均有感染,给养兔业造成巨大的经济损失。利用FHA基因设计了1对特异性引物,建立了一种PCR检测方法,旨在建立一种简便、快速、敏感、特异的诊断方法,主要实验和结果如下：1.兔支气管败血波氏杆菌的分离和鉴定：采集安徽滁州某兔场送检的疑似兔支气管败血波士杆菌感染的病死幼兔的鼻腔分泌物、肺脏、肝脏样品进行病原菌的分离与鉴定。本实验结合菌落形态、染色镜检、培养特性、血清学实验、生化鉴定和16SrRNAPCR扩增,确定该分离菌为兔支气管败血波氏杆菌。药物敏感实验研究表明：该病菌对强力霉素、氟苯尼考、庆大霉素、丁胺卡那霉素等高度敏感；对卡那霉素、链霉素、麦迪霉素、先锋噻肟等中等敏感；对氨苄青霉素、痢特灵、洁霉素、呋喃妥因等不敏感。人工感染实验结果显示,实验兔能复制出自然病例。2.兔支气管败血波氏杆菌PCR方法的建立：分离鉴定获得的兔支气管败血波氏杆菌提取DNA,根据丝状血凝素(filamentous hemagglutinin, FHA)基因序列(AF111796)设计了一对引物,PCR扩增,在734bp处扩增出一条与预期片段大小一致,特异性目的条带。用DNAStar软件分析测序结果表明,扩增片段与预期片段相符,该序列命名为FHA-734,和GenBank上其它波氏杆菌分离株(NC002929、NC018828、 NC019382)比较,核苷酸同源性为92.9%～96.6%。并做了PCR条件优化实验,结果显示当MgCl2添加量为1.0μl、退火温度选择58℃、循环数设置30个循环时显示有清晰特异的目的条带。3.PCR方法在临床的应用：从安徽、江苏不同地区的兔场无菌鼻拭子采取兔鼻拭子92份进行培养,利用兔支气管败血波氏杆菌的FH八基因序列设计引物进行PCR快速检测,并与传统的血清凝集实验进行对比,结果显示利用PC涨术检测阳性率为78.3%,血清凝集实验结果为33.7%。用PC胀速检测法对某兔场幼兔、青年兔和种兔随机抽样检测,结果显示幼兔Bb阳性率为90%；青年兔Bb阳性率为85%；种兔Bb阳性率为80%。