紫茎泽兰抑菌物质的分离纯化及发酵液抑菌效果的研究

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紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)为多年生草本植物,原产地为墨西哥,于上世纪40年代自边境传入我国云南省。紫茎泽兰生长繁殖能力极强,现在云南省大部分地区均有分布,且不断向北延伸。由于它对生态环境的破坏,给我国农林牧副业造成了极大危害。有关紫茎泽兰的报道很多,但绝大多数是关于其生物学特征、探讨它的生态系统和生物多样性、危害及控制措施等方面。尽管也有部分研究涉及其化学成分的分析,并从中分离到倍半萜化合物、β-谷甾醇、豆甾醇、蒲公英甾醇、棕榈酸酯及蒲公英甾醇乙酸酯等化合物,但相关化学成分的生物活性方面的报道较少。本文在初步获得紫茎泽兰乙醇提取物对马铃薯晚疫病具有较好的抑制作用基础上,通过硅胶柱层析、薄层层析等方法对紫茎泽兰抑菌的有效成分进行了系统的分离与纯化。同时,在确定紫茎泽兰里含有抑制马铃薯晚疫病菌活性成分的基础上,为了研究紫茎泽兰的适用价值,采用不同的发酵条件制备紫茎泽兰发酵液,并比较了同发酵液对马铃薯晚疫病菌的抑菌效果,获得了以下结果:1.确定了紫茎泽兰有效成分的分离、纯化方法通过对紫茎泽兰乙醇提取物采用石油醚、氯仿、乙酸乙醋、正丁醇分级萃取,然后经硅胶柱层析分离、结晶及重结晶等分离方法,获得了较好的分离纯化效果,得到了一个活性物质。2.鉴定了紫茎泽兰萃抑菌物质的生物活性成分利用IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等技术,鉴定出活性物质是一组由正二十四烷酸(分子量368)、正二十六烷酸(分子量396)、正二十八烷酸(分子量424)、正三十烷酸(分子量452)及正三十二烷酸(分子量480)组成的长链饱和脂肪酸。3.紫茎泽兰发酵液抑制马铃薯晚疫病菌的适宜条件通过不同条件下制备的紫茎泽兰发酵液对马铃薯晚疫病菌的抑制作用研究表明,无论是对马铃薯大西洋离体叶片,还是对整个植株马铃薯晚疫病菌都有较好的抑菌效果,最佳抑菌效果的条件是:发酵时间为75d、温度为25℃、浓度为50%。
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