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目的：分析IfimA型P.gingivalis脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)和菌毛蛋白FimA诱导人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)炎症反应的相关信号转导通路以及对HUVECs产生内皮素-1/一氧化氮的影响。
方法：1、体外培养HUVECs(CRL-2480)，待HUVECs单层融合后，分别与不同终浓度的IfimA型P.gingivalis-LPS(0.5μg/ml、5μg/ml、10μg/m)和rFimA(0.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)共同培养2h、6h、24h，提取HUVECs总RNA，Real Time-PCR检测CD14、TLR2(Toll-like receptor2)、TLR4(Toll-like receptor4)和MyD88(myeloiddifferentiation factor88)的mRNA表达水平，流式细胞术(FCM)检测HUVECs膜表面CD14、跨膜受体TLR2和TLR4蛋白表达量；2、体外培养HUVECs(CRL-2480)，待HUVECs单层融合后，分别与不同终浓度的IfimA型P.gingivalis-LPS(0.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)共同孵育2h、6h、24h，ELISA法测定ET-1的水平，硝酸还原酶法测定NO的水平。
结果：1、IfimA型P.gingivalis-LPS在6h、24h时诱导HUVECs CD14mRNA表达量增加，6h时CD14mRNA表达量增加呈浓度依赖性；IfimA型P.gingivalis-LPS在6h、24h时诱导HUVECs分泌CD14蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)，与基因水平相符，且CD14蛋白水平的增加呈浓度依赖性，2h时I fimA型P.gingivalis-LPS诱导HUVECs分泌CD14蛋白水平与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IfimA型P.gingivalis-LPS在2h、24h和6h时5ug/ml、10 ug/ml诱导HUVECs TLR2mRNA表达量增加，5ug/ml浓度下表达量增加呈时间依赖性；I fimA型P.gingivalis-LPS在6h、24h时诱导HUVECs分泌TLR2蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)，与基因水平相符，2h时IfimA型P.gingivalis-LPS在5ug/ml和10ug/ml浓度下诱导HUVECs分泌TLR2蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)。I fimA型P.gingivalis-LPS在6h、24h时诱导HUVECs TLR4mRNA表达量增加，24h时TLR4mRNA表达量增加呈浓度依赖性；IfimA型P.gingivalis-LPS在6h、24h时诱导HUVECs分泌TLR4蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)，与基因水平相符，2h时IfimA型P.gingivalis-LPS诱导TLR4蛋白水平与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。I fimA型P.gingivalis-LPS诱导HUVECs MyD88mRNA表达量增加，在2h和6h时MyD88mRNA表达量增加呈浓度依赖性，5ug/ml组MyD88mRNA相对表达量高于0.5ug/ml。
2、IfimA型P.gingivalis-rFimA诱导HUVECs CD14mRNA表达量增加，6h和24h时CD14mRNA表达量增加呈浓度依赖性，10ug/ml浓度下诱导HUVECsCD14mRNA表达量增加呈时间依赖性；6h时I fimA型P.gingivalis-rFimA诱导HUVECs分泌CD14蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)，2h、24h时0.5ug/ml和5ug/ml组细胞分泌CD14蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)，与基因水平相符。I fimA型P.gingivalis-rFimA在2h、6h时诱导HUVECs TLR2mRNA表达量增加，2h时TLR2mRNA表达量增加呈浓度依赖性；I fimA型P.gjngivalis-rFimA在2h时诱导HUVECs分泌TLR2蛋白水平高于阴性对照组(P<0.05)，与基因水平相符，6h时IfimA型P.gingivalis-rFimA诱导HUVECs分泌TLR2蛋白水平与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IfimA型P.gingivalis-rFimA在2h时诱导HUVECs TLR4mRNA表达量增加，且TLR4mRNA表达量增加呈浓度依赖性，6h和24h时TLR4mRNA表达量增加与阴性对照组比较均无统计学意义(P>0.05)；I fimA型P.gingivalis-rFimA在2h、6h、24h时诱导HUVECs分泌TLR4蛋白水平与阴性对照组比较均差异无统计学意义(P>0.05)。IfimA型P.gingivalis-rFimA在2h、6h和24h时诱导HUVECsMyD88mRNA表达量增加，2h和24h时MyD88mmRNA表达量增加呈浓度依赖性。
3、IfimA型P.gingivalis-LPS刺激HUVEC的ET-1分泌量增加，且随LPS浓度的增加而减少(P<0.05)，在24h时分泌量达到最高峰。不同浓度I型P.gingivalis-LPS刺激HUVEC的NO分泌量增加(P<0.05)，存在浓度依赖性和时间依赖性，在24h时分泌量达到最高峰。2h时0.5ug/ml、5ug/ml浓度下I fimA型P.gingivalis-LPS刺激HUVECs后ET-1/NO的水平高于阴性对照组(P<0.05)，ET-1/NO的水平随LPS浓度的增加而降低(P<0.05)；6h、24h时5μg/ml和10μg/ml IfimA型P.gingivalis-LPS刺激HUVECs ET-1/NO的水平低于阴性对照组(P<0.05)。
结论：P.gingivalis-LPS可通过CD14-TLR2/TLR4系统及MyD88依赖的信号通路参与P.gingivalis诱导内皮细胞产生炎症反应。IfimA型P.gingivalis-FimA刺激HUVECs通过TLR2活化MyD88，诱导炎症反应和细胞因子产生，表明CD14-TLR2系统及MyD88信号通路可能参与P.gingivalis-FimA诱导HUVECs炎症反应的信号传导。P.gingivalis可能通过其主要毒力因子LPS和FimA影响内皮细胞的功能，进而促进动脉粥样硬化(As)的发生、发展。