自噬在高尿酸血症肾损害中的作用及3-MA干预机制初步探讨

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随着人们饮食结构和生活方式的改变,高尿酸血症的发病率逐年增高。同时,由于慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者肾小球滤过率的下降,高尿酸血症在CKD患者中非常多见,且高尿酸血症与CKD患者的高死亡率密切相关。我们观察了本院行肾活检的不同病理类型的CKD患者,以年龄和性别相匹配的肾癌手术患者的癌旁正常肾组织为对照组,发现在CKD的肾脏组织病理上都存在自噬标志物(Beclin-1、LC3b、Atg7)和炎症指标MCP-1的表达,且表达强度和对照组相比有显著性差异,部位以肾小管间质为主,提示在这些肾脏病中,存在自噬及炎症增强的现象。然而,高尿酸是否与自噬相关,是否通过自噬加重了肾脏损伤,仍不清楚。因此,我们观察了自噬在高尿酸血症肾损伤(hyperuricemia nephropathy,HN)大鼠中的作用,以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对于HN的影响。发现通过3-MA抑制自噬,可以缓解喂饲腺嘌呤和氧嗪酸钾所致大鼠HN的发生,减轻了HN大鼠肾小球和肾小管间质的损伤,保护肾组织结构,改善肾功能,降低微量白蛋白尿的排泄,使肾组织中自噬性空泡数目和自噬标记物LC3和Beclin-1的表达明显减少。3-MA还能减少肾脏的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白的沉积和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,缓解肾小管上皮细胞在细胞周期G2/M期的阻滞。此外,抑制自噬能够降低高尿酸血症所诱导的脂蛋白2(Lcn2)表达,Lcn2是肾小管损伤的标志物之一。肾脏损伤可导致转化生长因子-β1(TGF-β1)和转化生长因子受体I(TGF-βreceptor I)表达增加,Smad3磷酸化,并激活与肾纤维化进程相关的多种细胞信号通路,包括Wnt、Notch、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、β-catenin和核因子-κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)。3-MA的干预可抑制所有这些细胞因子和通路的激活。此外,3-MA能有效抑制损伤肾脏组织中巨噬细胞和淋巴细胞的浸润以及多种促纤维化细胞因子/趋化因子的表达和释放。我们在培养的肾间质成纤维细胞中观察到3-MA抑制自噬可消除尿酸诱导的肾成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化以及激活TGF-β1、EGFR和Wnt信号通路,减少自噬标记物LC 3和Beclin-1的表达。上述研究表明,高尿酸血症可上调自噬,并激活多条促纤维化和促炎信号通路,诱导了肾间质成纤维细胞活化,使HN发生发展加速。阻断自噬可能将成为防治HN进展的新途径。
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