【摘 要】
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玉米(Zea mays L.)是世界上重要的粮食作物、饲料原料和能源作物。随着生物技术的发展,通过转基因方法培育抗虫抗除草剂玉米新品种是解决虫害和杂草问题和保障玉米产量的有效
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玉米(Zea mays L.)是世界上重要的粮食作物、饲料原料和能源作物。随着生物技术的发展,通过转基因方法培育抗虫抗除草剂玉米新品种是解决虫害和杂草问题和保障玉米产量的有效方法。本实验室以前获得了抗虫耐除草剂玉米转化体ZD12-6。该转化体是将Bt融合基因Cry1Ab/Cry2Aj和抗草甘膦基因G10evo-epsps构建在一个T-DNA中并通过农杆菌介导转化获得。与单个Bt蛋白相比,融合蛋白Cry1Ab/Cry2Aj可以扩大杀虫谱并减缓害虫抗性的发生和发展,有利于转基因玉米品种的长期使用。本研究对ZD12-6进行了 Southern分析,结果表明ZD12-6是外源T-DNA单拷贝插入的转化体。本研究进一步通过TailPCR确定了插入位点的旁侧DNA序列,并建立了 ZD12-6转化体的PCR特异性检测方法。这个方法为今后转基因玉米的身份验证和监控通过了技术保障。本研究检测分析了抗虫抗除草剂玉米ZD12-6的遗传稳定性及抗虫抗除草剂的性能。通过PCR、Western blot和ELISA等方法对ZD12-6不同代次材料进行检测分析,结果显示ZD12-6中的外源目标基因在DNA水平和蛋白表达水平上都稳定遗传,各个代次之间没有明显的差别。生物测定结果表明:转基因玉米ZD12-6对一龄玉米螟、棉铃虫和黏虫的杀虫效果良好;草甘膦抗性测定表明在5-6叶期喷洒45ml/m2的浓度为10g/L的草甘膦对玉米的正常生长发育没有不利影响。因此,ZD12-6的抗虫和抗除草剂功能能够满足产业化需要。
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