多粘芽孢杆菌分解饲料蛋白和促进鱼体生长的研究

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本研究采集了四川境内多个养殖池塘和湖泊鲜活鲤鱼的肠道内容物,经初筛获得55株芽孢杆菌菌株,其中具有产蛋白酶能力的菌株有19株,最终筛选出一株产蛋白酶能力强而且效果稳定的菌株,经鉴定为多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa strain),编号为A7。A7菌株能耐受pH 2.5的酸性环境和0.5%胆盐浓度,是耐酸性和耐胆盐较强的菌株,并且该菌株对嗜水气单胞菌具有很强的抑制作用。菌株的安全性试验表明,A7菌株在水产养殖中应用是安全的。通过A7菌株产酶条件的单因素优化试验发现,其最佳产酶条件是:pH值7.0,温度37℃,培养时间48h。A7菌株在28℃,110r/min水域振荡培养72h,产酶量达到最高,其酶活力为2998U。以玉米粉300g、麦麸400g、豆粕300g和pH6.8磷酸盐缓冲液500mL为固体发酵基础培养基,对固体发酵条件进行单因素优化试验,测定出A7菌株的最佳固体发酵条件是:在温度28℃,发酵时间48h和料水比1:1.0时,接种1.2×109cfu/mL的种子液5%于装量40g的250mL容量瓶中,发酵后固体活菌数可达2.85×1012cfu/g。采用体外消化法研究了A7菌株对鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕4种饲料蛋白质的体外消化能力。试验结果显示,添加A7菌株的所有试验组均对鱼粉干物质和粗蛋白的体外消化率没有明显促进作用(P>0.05),而添加含108cfu/mLA7菌株试验组对豆粕、菜籽粕、棉籽粕干物质和粗蛋白的体外消化率均有显著的促进作用(P<0.05),其消化率分别提高了44.85%、10.66%和53.05%;8.45%、、28.78%和63.9%。从鲤鱼幼鱼饲喂试验可以看出,在饲喂鲤鱼幼鱼50d后,饲料中添加A7菌株固体发酵物试验组幼鱼的平均增重率和特定生长率分别高于对照组的23%和11.8%,干物质表观消化率和蛋白质表观消化率的平均值分别为65.85%和85%,均显著高于添加酵母组、酵母+A7组和对照组(P<0.05)。
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