【摘 要】
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蛙虹彩病毒能够引起蛙类及其它一些水生动物发生暴发性疾病的一种病原体。本文根据本实验室已经完成全基因组测序虎纹蛙病毒(TigerFrogvirus,TFV)的2个功能基因的序列设计内外
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蛙虹彩病毒能够引起蛙类及其它一些水生动物发生暴发性疾病的一种病原体。本文根据本实验室已经完成全基因组测序虎纹蛙病毒(TigerFrogvirus,TFV)的2个功能基因的序列设计内外引物,优化了TFV的套式PCR(Nestedpolymerasechainreaction)检测技术,可检测到在其组织中10-4pg级别的TFV基因组DNA,并以此为主要技术手段,对广东省六市的水生动物进行蛙虹彩病毒分子流行病学调查。发现在虎纹蛙(Ranatigrinarugulosa)、沼泽绿牛蛙(Raneheckstheri)、中华鳖(Trionyssinensis)中潜伏感染蛙虹彩病毒率较高,在20%以上,并对其各地蛙虹彩病毒的2个保守基因进行系统进化分析,分析得出其在蛙虹彩病毒在中华鳖与虎纹蛙中病毒株基本相似,这为后续的虹彩病毒功能基因研究和基因工程疫苗的研制提供了理论基础。
为进一步验证蛙虹彩病毒在中华鳖中致病力,本实验对中华鳖注射使用细胞培养病毒,在温度为25℃左右,7-8天左右其死亡率在70-80%,其体表特征为红底板病症,PCR病毒检测,原位杂交检测其各器官均有病毒分布。利用甲醛灭活的病毒疫苗免疫注射后,其对病毒的保护率为70%左右。
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