β型血小板生长因子受体(PDGFRβ)和非受体型酪氨酸激酶c-Src是两种重要的在信号转导中具有活性的酪氨酸激酶。PDGFRβ及其配体在间质细胞迁移和增殖中起到了非常重要的作用。c-Src是最著名的一种原癌基因，通过与多种不同受体蛋白相互作用，在细胞生长、增殖、分化、运动和凋亡等生理过程中起着重要的调节作用。PDGFRβ和c-Src是开发抗癌药物最有希望的靶点之一，常被用于抗肿瘤药物的筛选。 本论文构建了在毕赤母中表达非受体型酪氨酸激酶c-Src融合蛋白的表达载体pPIC3.5K-SRC-P，并筛选到一株高表达菌株GS115-SRC-P，命名为M1。胞内蛋白磷酸化检测结果表明，在毕赤酵母的中表达的c-Src融合蛋白能引起胞内蛋白的大量磷酸化，细胞生长被严重抑制，但并不引起细胞死亡。5 L发酵罐发酵培养M1菌株，通过阴离子交换层析和镍柱亲和纯化后在250 mmol/L咪唑浓度下洗下目的蛋白，纯化得到的目的蛋白经过SDS-PAGE和Western blotting检测，目的蛋白大小约为92 kDa，ELISA检测目的蛋白具有很高的酪氨酸激酶活性。对纯化后的酪氨酸激酶c-Src初步建立了其小分子抑制剂筛选体系，最适的酶量选用35 ng/孔，最适ATP浓度为5μmol/L。商用c-Src抑制剂PP2在10μmol/L的浓度下对目的蛋白的抑制率为94％，说明本研究表达的c-Src具有正确的激酶催化活性，可以作为靶标蛋白用于抗肿瘤药物的筛选。 本论文还构建了PDGFRβ融合蛋白的表达载体pPIC3.5K-PDGFRβ，转化毕赤酵母GS115，通过组氨酸营养缺陷型筛选，G418高拷贝菌株筛选，以及摇瓶诱导表达筛选，得到一株高表达毕赤酵母菌株M3。镍柱亲和纯化在250 mmol/L咪唑浓度下洗下目的蛋白，Western blotting验证目的蛋白约为90.08 kDa，ELISA检测目的蛋白具有酪氨酸激酶活性。结果表明表达的PDGFRβ可用于筛选其小分子抑制剂。