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有机磷水解酶(OPH)能够高效水解含有P-O、P-F、P-S和P-CN的有机磷化合物,然而游离的OPH因催化寿命短、保存难度大、不可回收等缺点而限制了它在实际工业中的应用,将游离OPH与不溶性载体结合制备成不溶于水的固定化酶可以克服这些限制。本文以丙烯酰氯和聚乙二醇为原料合成了不同分子量的聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA),并探讨了它们的制备条件。通过IR、1H-NMR对所合成的不同分子量PEGDA进行结构表征。以2-羟基-4’-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮(I-2959)为光引发剂对不同分子量PEGDA进行光固化研究。采用光固化的方法制备了聚乙二醇二丙烯酸酯水凝胶(PEGDA-Gel),并通过扫描电子显微镜观察它们的形貌,发现不同分子量PEGDA制备的PEGDA-Gel都呈多孔结构;同时研究了 PEGDA-Gel的溶胀性能,通过溶胀实验对PEGDA-Gel交联网络的网格尺寸进行理论计算,发现分子量越大的PEGDA制备的PEGDA-Gel的吸水性能越好,交联网络结构的网格越大。考察了 365 nmUV光源、I-2959浓度以及不同分子量PEGDA对OPH活性的影响,然后将OPH分别与5种不同分子量PEGDA水溶液混合,通过光固化法将OPH包埋在PEGDA-Gel内部制备成固定化OPH(PEGDA-Gel@OPH),发现制备的PEGDA-Gel@OPH的耐酸性、耐碱性、热稳定性、储存稳定性都要优于游离OPH。小分子量PEGDA制备的PEGDA-Gel@OPH的性能优于大分子量PEGDA制备的PEGDA-Gel@OPH;大分子量PEGDA制备的PEGDA-Gel@OPH的酶活恢复率要高于小分子量PEGDA制备的PEGDA-Gel@OPH。与传统制备固定化酶方法相比,光固化-包埋法操作简单便捷,光反应条件温和,对酶造成的损伤比较小。