IL-27对CIITA和MHC II类分子的调节作用的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maomao0464
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
白介素27(IL-27)是一个IL-12相关的多功能的细胞因子,它在免疫和炎症发生的过程中表现出似乎相互矛盾的作用。IL-27包含p28和EBB两个亚基,作用于WSX-1亚基(也叫作TCCR)和gp130亚基构成的异二聚体受体(IL-27R)传递信号。很多类型细胞如T细胞、自然杀伤细胞、B细胞、单核细胞、肥大细胞和中性粒细胞都表达IL-27R。IL-27R与配体的结合诱导了胞内的信号途径,包括Janus kinases(JAK)和STAT转录因子。起初IL-27被认为通过诱导Ⅰ型辅助性T细胞(TH1 cells)的分化而促进炎症的发生。很多研究表明,在TH1分化的早期,IL-27诱导转录因子T-bet的表达,T-bet可上调初始CD4+T细胞IL-12受体的β2亚单位(IL-12Rβ2)的表达,使其获得对IL-12的反应性;也有研究表明,IL-27可以不依赖于T-bet而促进TH1分化。然而,在许多感染和自身免疫疾病动物模型中,缺乏IL-27受体的小鼠在TH1和TH2型反应中都发展成为过度的病理性炎症反应,这表明IL-27有抗炎作用。就IL-27的抗炎机制而言,IL-27可通过抑制活化的CD4+T细胞IL-2的产生而抑制其增殖。IL-27还能在很多动物模型中如实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE,多发性硬化的动物模型),抑制产IL-17的辅助性T细胞(TH17细胞)介导的炎性反应。最近的研究还发现了IL-27的另一个新功能,即IL-27能诱导产生IL-10的调节性T细胞的产生,IL-10参与IL-27对IL-17的抑制作用,但不为IL-27抑制Th1细胞IL-2的产生所必需。在继发性转移而形成的EAE模型中,IL-10介导了IL-27对脑膜自身反应性T细胞的抑制作用。IL-27的抗炎和促炎作用有待于进一步研究。MHCⅡ类分子和它们的辅助分子,如恒定链(Ii)和非经典的MHCⅡ类分子(DM和DO)在胸腺分化(thymic education)的过程中限制机体对自身和外源性抗原的免疫反应有重要作用,他们的表达也对外周T细胞激活至关重要。MHCⅡ的表达被很多细胞因子包括干扰素-γ(IFN-γ)调控,IFN-γ能通过上调免疫细胞MHCⅡ的表达而增强免疫反应。MHCⅡ基因的转录主要由一个关键的的调节子,Ⅱ类转录活化子(classⅡtransactivator,CIITA)控制,CIITA的基因至少包含3种不同的启动子(CIITApⅠ、CIITApⅢ和CIITApⅣ),这些启动子表现出组织细胞特异性的激活及对细胞因子的不同反应性。我们的研究主要集中在探讨IL-27促炎的机制。首先我们观察了IL-27对内皮细胞的免疫调控作用。IL-27刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)可快速诱导干扰素调节因子1(IFN regulatory factor-1,IRF-1)的表达,并显著升高CIITA亚型Ⅳ的表达。与CIITAⅣ的表达相一致,MHCⅡ基因的表答也升高。IL-27也能增强MHCⅠ类分子的表达。另外,在IL-27的作用下,β2-m和TAP-1 mRNA的表达水平也升高。基因芯片分析表明IL-27可以显著上调内皮细胞很多和免疫调节相关的基因,包括趋化因子CXCL9、CXCL10、CX3CL1的表达。这些结果首次表明IL-27能在内皮细胞上调MHCⅡ类和Ⅰ类分子的表达,提示IL-27对血管内皮的免疫功能有重要的调控作用。我们进一步观察IL-27对THP-1单核细胞系的作用。THP-1细胞是研究单核细胞的很好的模型。与在内皮细胞相似,IL-27可上调THP-1细胞CIITAⅢ和CIITAⅣ的mRNA表达水平,导致细胞表面MHCⅡ类分子的表达增加,以及HLA-DM和DO的表达水平升高。另外,IL-27可上调beta-2m、TAP-1和MHCⅠ类分子的表达。进一步的研究表明,IL-27可增强THP-1细胞表面共刺激分子CD80和CD86及粘附分子CD54的表达。这些结果表明IL-27可促进单核巨噬细胞的抗原提呈功能。为了进一步分析IL-27通过何种信号机制参与调节CIITA和MHCⅡ的表达,我们用ERK抑制剂U0126、p38MAPK抑制剂SB203580和PI3K抑制剂LY294002来观察各条信号通路在IL-27诱导CIITA和MHCⅡ表达中的作用。我们的结果表明p38MAPK和PI3K信号通路都为IL-27作用下最优化的MHCⅡ的表达所必需,而ERK信号通路对IL-27诱导的MHCⅡ表达有抑制作用。另外,PI3K信号通路也为IL-27诱导最优化的MHCⅠ表达所必需。这些结果表明PI3K信号通路参与正调控IL-27介导的效应,而ERK信号通路对IL-27诱导的MHCⅡ类分子的表达有抑制作用。进一步的研究表明,TLR2激动剂Pam3CSK4和TLR4激动剂LPS介导的TLR信号能部分阻断IL-27诱导得THP-1细胞MHCⅡ的表达。LPS的抑制效应部分通过ERK和p38MAPK信号途径介导。研究表明IL-27对很多实体瘤有很强的抗肿瘤效应。IL-27的抗肿瘤机制主要包括诱导CD4+T细胞、CD8+T细胞和NK细胞的活化。IL-27还能通过诱导IP-10和MIG的表达而抑制肿瘤的血管新生。我们的另外一项研究是构建IL-27的表达载体而评估其对小鼠白血病模型的抗肿瘤效应。我们用重叠延伸PCR来扩增信号肽和单链IL-27融合基因,然后把这些基因插入许多真核表达载体中,包括pIRES2-EGFP、pcDNA3.1(-)、p3XFLAG-CMV-9和PCAGEN。用免疫沉淀和western blot检测IL-27表达载体转染的293T细胞上清中IL-27的分泌和表达。我们用液压基因转移法(hydrodynamic gene transfer,HGT)将IL-27表达载体导入小鼠体内后,在小鼠血清中也能检测到IL-27的表达。我们用能否诱导HUVECsCIITAmRNA的表达来鉴定IL-27的生物学活性。总之,我们的研究首次表明IL-27能够诱导单核细胞和内皮细胞CIITA和MHCⅡ的表达。IL-27还能上调MHCⅠ类分子、共刺激分子和粘附分子的表达。另外,IL-27能激活一个重要的转录因子IRF-1。ERK、p38MAPK和PI3K信号通路可被IL-27直接激活并在调节IL-27效应的过程中有关键作用。这些结果表明IL-27有调节抗原提呈的新功能,并揭示了一种IL-27促进T细胞的激活和获得性免疫发生的新机制。
其他文献
大力加强企业廉洁文化建设,用积极健康的思想观念和企业文化占领文化阵地,对于抵制腐朽思想文化侵蚀、促进企业深化改革、加快发展与和谐稳定具有十分重要的作用。 一、把握一
目的:探讨外源性硫化氢(H2S)对三氯化铁(FeCl3)诱导的小鼠颈动脉血栓模型凝血和纤溶活性的影响。方法:本实验分为空白对照组、模型组、不同浓度(12.5、25和50μmol/kg)的硫氢化钠(Na
鉴于目前大学英语四级考试阅读理解题的测试点主要包括阅读速度、理解能力以及记忆能力三个方面,因此本文主要从这三个方面详细的介绍和讲解了各种解题技巧.
高中的政治课教学与学校校风建设、学校管理的有机结合是学校可持续发展的长期工作,本文就高中政治课《文化生活》的教学实践,对这方面的内容进行了思考。
提出了采用萃取精馏隔壁塔精制含水乙腈的新工艺,并与传统的双塔萃取精馏工艺进行了对比。以乙二醇为萃取剂,采用Aspen Plus中的Rad Frac模型对新工艺进行了严格稳态模拟,并
《牡丹花开》创作团队对宁波红牡丹书画国际交流社社长姜红升的故事持续关注近五年,选择书画社教授外国友人学习中国传统书画取得显著成绩之后,投入精兵强将深入采访。作者舍
<正>我国目前正处在转型时期,随着工业化、城镇化进程加快推进,作为重中之重的"三农"也面临前所未有的挑战。梨果业发展过程中必须改善传统的管理观念,创新发展模式,以优质、
近年来,党中央不断加大反腐倡廉的力度,给国有企业反腐倡廉建设指明了方向。当前,八钢公司正处于快速发展的关键时期,制度建设在企业各个方面和环节发挥了积极作用。本文结合八钢
作为土地开发的重要组成部分,精准的土地测绘可以保证土地资源合理分配,提高土地资源利用效率。因此,加强这方面管理是非常重要的,但是在实际中,由于外界的各种影响因素存在,