湖羊PRL、PRLR基因与泌乳性状相关性分析

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近年来,新疆大量引进湖羊、小尾寒羊等多胎羊,大力发展规模化养羊。湖羊一胎多羔,繁殖率达250%左右,湖羊母羊的泌乳能力严重影响着羔羊的成活率及生长发育。本研究从泌乳性状收集及分子遗传基础入手,初步研究了湖羊的泌乳性状及与PRL、PRLR基因的关系,描述了湖羊的泌乳生产规律,初步发现了一些控制湖羊泌乳量大小的PRL、PRLR基因的SNP标记。在新疆米东区塞外银羚种羊场,选择同龄,初产的41只湖羊为研究对象,分别测定产后1-8周,每周1次的泌乳量,在第1,3,8周取样分布测定乳成分:蛋白率,乳糖率,乳脂率及总固体。对PRL基因、PRLR基因全序列进行测序及遗传多态性和遗传变异分析,筛查SNP位点。并运用最小二乘法分析了所发现的SNP位点与湖羊泌乳性状的相关性,得到如下结论:1.湖羊产后1-56天泌乳期内,个体最低总泌乳量为(14.34±0.052)㎏,最高总泌乳量为(54.10±0.078)㎏。湖羊群体平均总泌乳量为(31.25±0.06)kg,日均泌乳量为(0.558±0.05)kg。研究群体的总泌乳量符合正态分布。从泌乳量曲线观察:群体泌乳量在第1-10天上升较快,在第23天泌乳量达到最高值,之后缓慢下降。研究参考Wood泌乳曲线方程Y=Axbe-ct,对舍饲湖羊1-56天泌乳曲线进行模拟,得出舍饲湖羊产后1-56天泌乳曲线方程为:Y=450.30t0.264e-0.011t。可得产后56天泌乳量为48.72kg,与实际测定结果相近。不同产羔数湖羊泌乳量之间没有相关性,但差异显著(P<0.05)。乳成分前期变化较为明显,其中随着泌乳天数的增加,乳糖和总固体含量呈上升趋势;乳脂前期缓慢上升,达到峰值后缓慢下降;蛋白含量在后期缓慢升高。2.在湖羊PRL基因上发现23个SNP位点,通过遗传结构分析确定5个与泌乳性状相关的SNP位点。分别位于序列第2内含子81bp处(P1288),第2外显子71bp处(P1039),第2内含子1204bp处(P2351),第3内含子952bp处(P4244)和第3内含子1299bp(P4591)处。处于第2外显子的SNP位点P1039 A>G氨基酸无变化,属于同义突变。P4591位点CC型在第八周泌乳量显著高于AA型(P<0.05);P1228位点AC型后期乳脂率极显著高于CC型(P<0.01),中期总固体AC型显著高于CC型(P<0.05);P1039位点AA型前期乳脂率极显著高于AC型和CC型;P2351位点AA型和GG型中期乳脂率显著高于AG型(P<0.05),AA型中期蛋白率极显著高于AG型和GG型,AA型和AG型极显著高于GG型(P<0.01);P4244位点CC型早期乳脂率极显著高于AA型(P<0.01),后期蛋白率和中期总固体CC型极显著高于AA型(P<0.01)。连锁不平衡和单倍型分析,其中有7种单体型频率大于0.02,仅单体型CCATT蛋白率显著高于AAATT型。其他各单体型的乳成分和泌乳量均差异不显著。3.在湖羊PRLR基因上发现1个符合统计要求的SNP位点,该位点AA、AT和TT型基因频率分别为0.146(6),0.439(18)和0.415(17),χ2适合性检验该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态。不同基因型的的个体1-5周泌乳量差异不显著(P>0.05),6-8周泌乳量A等位基因个体显著优于T等位基因个体(P<0.05)。AA型和TA型的泌乳量从第四周开始比TT型要大。三种基因型个体间的乳脂率,乳蛋白率,乳糖率,总固体差异不显著(P>0.05)。但可以看出不同时期乳脂率T等位基因优于A等位基因;不同时期蛋白率TA型高于TT型和AA型;基因型对乳糖变化没有影响;不同时期总固体TT型高于TA和AA型。
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