大气压等离子体射流的特性及其在细胞保护中的应用

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大气压等离子体射流(APPJ)具有操作简单、反应效率高、无危险物残留、气体温度低、对温敏材料无灼伤等优点,近年来已成为“等离子体医学”领域的有效工具。前期研究表明,APPJ对氧化应激损伤的SH-SY5Y细胞具有神经保护作用,这与AP PJ导致的一氧化氮(NO)含量上升有关。但APPJ对其它种类细胞损伤的保护作用和保护机制还不清楚。本文利用交流驱动产生的大气压氦气等离子体射流对缺氧损伤的神经细胞进行处理,通过实时记录缺氧损伤后细胞的活性变化,细胞外液中NO和ROS含量的变化和细胞形态的改变,阐明大气压等离子体射流对缺氧损伤神经细胞的保护机制;并对实验射流的物理属性、放电特性及发展过程进行探究。本论文实验工作包括两部分。第一部分是大气压等离子体射流特性的研究。用ICCD记录等离子体射流头部的发展过程,得到不同外加电压、电源频率下射流发展速度的变化曲线。结果表明,随着外加电压和电源频率的增加,射流发展速度变快,速度最大值也增大。在影响射流特性的各种放电参数中,电压和气体流量是影响射流长度的关键因素,频率对射流长度影响不大。通过分析NO发射光谱,发现射流管口处NO的强度值最大;在远离管口处NO强度递减。管口处NO的强度值与电源频率、气体流量之间有明显的线性关系,但与外加电压之间无确定关系。第二部分是大气压等离子体射流在细胞保护中的应用研究。在ECIS培养板中培养SH-SY5Y细胞,利用APPJ对细胞进行处理,将处理后细胞置于常氧环境中培养5小时,再对其进行24小时缺氧处理;分别利用ECIS实时记录细胞形态变化、LDH方法记录细胞凋亡、Griess法记录细胞外液中的NO含量、过氧化氢检测试剂盒检测培养液中ROS含量。结果表明,20小时的缺氧处理后,细胞表现出明显的增殖,这种增殖可以被30秒的射流处理抑制。缺氧处理24小时后,细胞发生明显皱缩,损伤严重,APPJ处理可以明显改善细胞状态。同时,经APPJ处理后细胞外液中的NO浓度显著增加。这表明APPJ可以保护SH-SY5Y细胞免受缺氧导致的损伤,这种保护作用可能与NO有关。
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