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巨噬细胞是免疫系统中重要的效应细胞,其表型和功能具有极强的可塑性。不同的微环境下,巨噬细胞可发生表型及功能极化从而呈现出不同的功能。肿瘤组织中巨噬细胞的功能具有两面性,是肿瘤发展过程中的一把“双刃剑”。巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)是一个多功能的细胞因子,其异常表达和功能与多种疾病的发生和进程密切相关。膜结合M-CSF (mM-CSF)是它的一种选择性剪接产物,在血液系统恶性肿瘤中可检出其高表达,具有粘附分子样作用,可以通过并置性作用机制部分代替M-CSF的功能。基于mM-CSF高表达常发生于造血系统恶性肿瘤中,提示它在这些恶性疾病中具有重要的生物学意义。本论文是在我室前期研究的基础上,对高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞对巨噬细胞功能性极化的影响进行了初步探索。采用裸鼠皮下成瘤实验,将高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞接种裸鼠。免疫荧光法观察瘤组织中巨噬细胞的分布及表型特征。发现瘤组织中有大量的巨噬细胞浸润,且巨噬细胞表达选择性活化巨噬细胞表面标记CD206。采用流式细胞术分选瘤组织中的巨噬细胞,对其表型和功能进行进一步探索。虽然能获得一定数量的巨噬细胞,但巨噬细胞易贴壁,回收率不高。故选取小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7与高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞体外共培养,流式细胞术检测共培养巨噬细胞表面分子CD206(选择性活化巨噬细胞表面标记)和细胞因子IL-10,IL-12,IL-6,TNFα的蛋白水平表达情况。实时定量PCR检测高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞对巨噬细胞基因表达的影响。吞噬实验检测巨噬细胞功能的变化。结果显示,高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞显著上调巨噬细胞表面选择性活化巨噬细胞表面标记CD206的表达强度；上调细胞因子IL-10,TNFα的表达水平,下调IL-12,IL-6的表达水平；基因表达水平上,下调IL-18,上调ARG1、VEGFA、CXCL4、MMP9、uPA的表达水平；功能上,高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞使巨噬细胞的吞噬能力明显增强。以上结果表明,mM-CSF对巨噬细胞的功能性极化具有重要影响,高表达mM-CSF的血液肿瘤细胞使巨噬细胞异常活化为具有IL-10 high,IL-12 low,IL-6 low, TNFαhigh的巨噬细胞类群,该种免疫表型的巨噬细胞在血液恶性肿瘤的发生发展中可能具有重要的作用。