海洋细菌Bacillus Pumilus PLM4抗肿瘤胞外多糖的研究

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本实验室筛选到的一株海洋短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus PLM4)能产生具有抗肿瘤活性的胞外多糖。本研究主要对该胞外多糖进行了分离纯化、部分性质、基本结构与抗肿瘤活性的初步研究,结果如下: 海洋短小芽孢杆菌发酵液通过离心去除其中的菌体,然后上清液再经浓缩、透析、浓缩、乙醇沉淀分离得到胞外多糖粗品。该胞外多糖粗品经Sephadex G-100凝胶柱层析能够有效地得到纯化,这已经聚丙烯酰胺凝胶电泳以及高效凝胶渗透色谱法所证实。 纯化后的胞外多糖经气相色谱-质谱分析可知含有甘露糖与葡萄糖两种糖基组分,其摩尔比为3.37:1;经化学分析得知该多糖中还含有较多的己糖醛酸(56.96%)与少量的丙酮酸(0.83%),不含有乙酰基与硫酸基。该胞外多糖经凝胶渗透色谱法测定其分子量为116,000。 经红外光谱分析、高碘酸氧化以及Smith降解可知该胞外多糖的基本结构是以1→3连接为主体,但有较多1→6连接分枝,以及少量的1→2连接和很少量的1→4连接,可见该胞外多糖为具有复杂分枝结构的酸性杂多糖,其糖基为β-D-甘露吡喃糖与β-D-葡萄吡喃糖构型。 抗肿瘤活性的初步研究表明纯化胞外多糖的体外抗人喉癌Hep-2细胞活性显著,Gl50为<15.6ug/ml,该胞外多糖粗品(剂量:150mg/kg×10)的小鼠体内抗Sarcoma-180、H22实体瘤活性明显,抑瘤率分别为28.70%和37.72%。
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