研究背景及目的间质细胞的功能在老年男性、糖尿病病人、接受放射治疗的直肠癌病人中是逐渐下降的,人体内雄激素合成和分泌的量就会减少,引起一系列相关症状。典型的疾病有老年迟发型性腺功能减退症。另外先天性雄激素不足导致患有克氏综合症的患者达到152/10000。外源性雄激素的摄入就成了这些病人的常规治疗方法,外源性睾酮的摄入在一定程度上也是有利于男性第二性征的维持和性功能障碍的恢复。另外,长时期补充雄激素治疗不易达到理想的治疗效果,可能存在副作用和潜在的风险。目前自体干细胞移植成为研究的热点,干细胞移植后在自身的下丘脑-垂体-性腺轴调节下,通过自身反馈和负反馈相互作用的机制补充机体生理活动所需要的激素,从而避免激素过量和补充不足的问题。骨髓间充质干细胞是具有向多种中胚层细胞分化能力的成体干细胞。同时由于它可作为自体移植的源细胞,不存在伦理学的问题又能有效地避免免疫排斥反应。而睾丸间质细胞就起源于中胚层。两者起源相同,共有许多相似的特性。最近的研究发现骨髓间充质干细胞能分化为睾丸类间质细胞,主要是通过类固醇激素合成因子-1的稳定转染。有研究证实类固醇生成因子-1是一个主要的类固醇合成转录调控相关的基因。而中药单体淫羊藿苷是从淫羊藿中提取出来的黄酮类化合物。淫羊藿苷具有提高体内睾酮的水平和促进骨髓间充质干细胞转化的功能。本研究是观察淫羊藿苷促使骨髓间充质干细胞在大鼠睾丸内向类间质细胞分化中的作用。方法：4周龄SPF级雄性SD大鼠50只,体重约200g左右。采用随机数字表法平均分为5组,每组10只。分为A组正常对照组；B组照射对照组；C组移植干细胞组D组移植后低剂量灌胃组和E组移植后高剂量灌胃组。A组正常饲养,B、C、D、E组大鼠睾丸均接受60Coγ射线(6Gy+8GY)照射,分次照射时间间隔为24小时。C、D、E组大鼠在60Co γ射线照射完成1周后向大鼠睾丸组织中注射第九代骨髓间充质干细胞0.lml(规格1*10-6)。移植过骨髓间充质干细胞的D组和E组大鼠分别用淫羊藿苷2mg/100g,5mg/100g灌胃8周。8周后大鼠被处死,测量大鼠的体重。无菌条件下收集血液和睾丸组织并称重。一部分睾丸组织用福尔马林固定,用来做HE染色和免疫荧光分析。另一部分睾丸组织存放于-80℃冰箱中备行RT-PCR用。采用60Co Y射线照射大鼠睾丸致间质细胞损伤模型,移植入带有绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞于造模后的大鼠睾丸内,然后用中药单体淫羊藿苷悬液灌胃8周。采用ELISA法检测循环血清中的睾酮和黄体生成素。通过RT-PCR检测睾丸组织中SF-1和P450scc基因的转录水平。采用免疫荧光和共聚焦分析的方法检测带有GFP表达和间质细胞标志物P450scc的细胞。结果：骨髓间充质干细胞移植组,尤其是高剂量淫羊藿苷灌胃组似乎可减轻60Co y射线照射所致的损伤。免疫荧光和共聚焦分析显示GFP阳性的移植细胞定位于睾丸的间质中,在干细胞移植组和淫羊藿苷灌胃组中这些细胞同时表达P450scc。RT-PCR证实与照射对照组相比,在这些移植干细胞组中P450scc表达增加。同时在高剂量淫羊藿苷组中睾丸内SF-1表达显著升高。结论：中药单体淫羊藿苷在大鼠体内可作为一种促进型诱导剂促使骨髓间充质干细胞向睾丸类间质细胞分化,这种能力主要与类固醇生成因子-1的高表达有关。