木霉是食用菌生产中一种危害严重的竞争性真菌,常造成食用菌的大幅减产;几丁质酶是多种动物、植物及微生物所表达的降解几丁质的酶类,其中不少种类具有抗真菌活性。本试验以1株木霉污染的平菇菌袋中分离到的木霉(Trichorderma spp.)及3株对木霉敏感性不同的平菇(Pleurotus ostreatus)菌株为材料,即农平一号(木霉敏感)、(CCMSSC)00358(木霉敏感)和(CCMSSC)00406(木霉抗性),探究几丁质酶在平菇对木霉抗性中的作用。用添加磨碎的木霉菌丝的液体完全培养基(经高温高压灭菌)、培养木霉后的液体完全培养基(经高温高压灭菌)、完全培养基(对照)培养3株平菇菌株,分别用bradford法和3,5-二硝基水杨酸比色法检测两种培养基中平菇菌丝蛋白质的含量和胞内几丁质酶的活性。结果表明:木霉菌丝能强烈抑制农平一号和00406的生长;木霉培养液比菌丝更能诱导平菇产生更多量的蛋白质,3株平菇在3种处理下所表达的蛋白质的量并无菌株间的明显差异。木霉菌丝或培养液对平菇几丁质酶的酶活无明显影响,00406几丁质酶的酶活在各种处理中均最高。将木霉与3种平菇分别共培养,将其胞内与胞外酶粗提液通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,与含3种几丁质酶特异性荧光底物的琼脂糖凝胶原位反应,在365 nm紫外灯下检测荧光条带的位置以确认显色几丁质酶的大小和类型;各菌株所表达的几丁质酶的类型和大小由各菌株单独培养后按上述步骤确定。结果表明,农平一号、00358和00406均表达胞内N-乙酰葡糖胺糖苷酶,相对分子质量分别为123 KDa、177 KDa、155 KDa,胞外未检测到几丁质酶活性,与木霉共培养并未诱导其产生更多种类的几丁质酶。木霉在培养基中不存在几丁质诱导物时未检测到几丁质酶,与平菇共培养不能诱导其产几丁质酶;在几丁质作为唯一碳源时木霉表达5种类型的几丁质酶,即N-乙酰葡糖胺糖苷酶,相对分子质量分别为93 KDa(胞内)和82 KDa(胞外);胞外表达的二糖酶,相对分子质量为25 KDa;胞外表达的内切几丁质酶,相对分子质量分别为34 KDa和24 KDa。